服務(wù)流程：

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

豚鼠冷球蛋白(CG) 2-異-6-酚(泊酚雜質(zhì)O)傷寒沙門氏菌體蛋白O抗原抗體

豚鼠神經(jīng)肽Y受體Y1(NPYR1)2,2-二-4-異-1,3-并二茂傷寒沙門氏菌鞭毛抗原H抗體

豚鼠彈性蛋白(ELN) 4-羥泊酚4-O-β-D-葡萄糖苷酸14-3-3γ抗體

豚鼠磷脂酰肌蛋白聚糖1(GPC1) 4-羥泊酚1-O-β-D-葡萄糖苷酸14-3-3σ抗體

豚鼠骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)心得安二14-3-3τ蛋白抗體

豚鼠白介素23 p40 (IL-23 p40)鹽酸心得安14-3-3β抗體

豚鼠集落激因子(CSF) (R)-(+)-鹽酸心得安SLAMF6抗體

豚鼠衰變加速因子(DAF) 外消旋心得安β-D-葡萄糖苷酸鈉鹽a-包襯蛋白抗體

豚鼠著絲粒蛋白B(CENPB) 外消旋7-羥心得安磷酸化突觸融合蛋白1抗體

豚鼠集落激因子2受體α (CSF2Rα)外消旋心得安-d7線粒體內(nèi)鈣結(jié)合天冬氨酸/谷氨酸載體蛋白抗體

豚鼠N-酰半乳糖-6-硫酸酯酶(GAS)5-羥鹽酸心得安線粒體二羧酸載體蛋白11抗體

豚鼠凝溶膠蛋白(GS) (R)-4-羥鹽酸心得安eIF4E結(jié)合蛋白2抗體

豚鼠腎素(REN)(S)-4-羥鹽酸心得安血清淀粉樣蛋白P成份抗體

豚鼠骨成型蛋白4 (BMP-4) (+/-)-4-羥鹽酸心得安轉(zhuǎn)錄因子Sox3抗體

豚鼠α-黑色素激素(αMSH) (+/-)-4'-羥硫酸心得安神經(jīng)內(nèi)分泌顆粒蛋白5抗體

豚鼠肌營養(yǎng)不良蛋白(DMD) 4-羥心得安β-D-葡萄糖苷酸 突觸結(jié)合蛋白11抗體
肉毒桿菌毒素B檢測試劑盒（熒光PCR法）Slc26a5/Prestin/FITC  熒光素標(biāo)記外毛運動蛋白/可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白Slc26a5抗體IgGBoc-S-芐-L-半光氨酸  99%

SLC39A6/FITC  熒光素標(biāo)記SLC39A6抗體IgGN-叔丁氧羰-S-(4-芐)-L-半胱氨酸  96%

SLC40A1/FPN1/FITC  熒光素標(biāo)記膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白SLC40A1抗體IgGBOC-S-(4-METHOXYBENZYL)-L-半胱氨酸  98%

SLK/Fyn/FITC  熒光素標(biāo)記酪氨酸蛋白激酶Fyn（同步原癌因）抗體IgGN-Boc-N'-三-L-谷氨酰;N-叔丁氧羰-N'-三-L-谷氨

Slit2/Slil3/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體IgGN-叔丁氧羰-N'-(9-氧雜蒽)-L-谷氨酰 97%

SLT/SLT-IIe(O139) /FITC  熒光素標(biāo)記抗豬水腫素（O139）抗體IgG2-叔丁氧羰氨-4-氨酰丁酸 4-酯  98%

Slug/FITC  熒光素標(biāo)記鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體IgG4-叔丁氧羰氨-4-氨酰丁酸  98%

Smac/DIABLO/FITC  熒光素標(biāo)記線粒體促凋亡蛋白抗體IgGD-叔丁氧羰-L-谷氨酸α芐脂 98%
反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。