當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>PCR類>>熒光定量PCR試劑盒>> 50次海鷗彎曲菌檢測試劑盒(熒光PCR法)
規(guī)格 | 50次 | 貨號 | YS-P013931 |
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品牌 | YSRIBIO |
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐
的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:海鷗彎曲菌檢測試劑盒(熒光PCR法)
產(chǎn)品貨號:YS-P013931
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品分類:PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.公司產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
豚鼠優(yōu)球蛋白(EL) 丹曲林鈉半七水合物鏈激酶抗體
豚鼠端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(TERT)3-氧地氯雷他定裝配銜接蛋白180抗體
豚鼠唾液酸結(jié)合免疫球蛋白樣凝集素1(SIGLEC1)異地氯雷他定液泡蛋白分選受體SORCS抗體
豚鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)N-地氯雷他定滑膜肉瘤X染色體相關(guān)2抗體
豚鼠免疫球蛋白G Fc段受體II(FcγR II/CD32) 5-羥地氯雷他定突觸相關(guān)蛋白102抗體
豚鼠核受體相互作用蛋白1(NRIP1)6-羥地氯雷他定PSD95結(jié)合蛋白3抗體
豚鼠八聚體轉(zhuǎn)錄因子2A(OTF2A) 3-羥地氯雷他定肺表面活性蛋白C抗體
豚鼠中性粒彈性蛋白酶(NE/ELA2) 地氯雷他定-d45-羥色受體1D抗體
豚鼠果糖二磷酸縮酶C(ALDOC) 3-羥地氯雷他定β-D-葡萄糖酸苷5-羥色受體1E抗體
豚鼠酰肽受體2(FPR2)地氯雷他定吡啶N-氧化物5-羥色受體1F抗體
豚鼠解旋酶樣轉(zhuǎn)錄因子(HLTF)奧司他韋酸-d3 5-羥色受體2A抗體
豚鼠破骨激因子1 (OSF)奧司他韋酸5-羥色受體2B抗體
豚鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95/TNFRSF6) 地布卡因5-羥色受體3A抗體
豚鼠磷酸化外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)鹽酸地布卡因-d95-羥色受體3D+3E抗體
豚鼠甘露糖結(jié)合蛋白(MBP/MBL) 多利培南5-羥色受體3D抗體
豚鼠角膜鎖鏈蛋白(CDSN)多沙普侖5-羥色受體4抗體
海鷗彎曲菌檢測試劑盒(熒光PCR法)S100A13/FITC 熒光素標(biāo)記鈣結(jié)合蛋白S100A13抗體IgGBOC-β-氨酸 98%
Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化S6核糖體蛋白抗體IgG叔丁氧羰-L-天冬氨酸-4-叔丁酯 99%
Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化S6核糖體蛋白抗體IgGN-叔丁氧羰-L-谷氨酸5-芐酯 97%
S100B/FITC 熒光素標(biāo)記S100B蛋白抗體IgGN-Boc-L-天冬氨酸-5-叔丁酯 98%
S6PDH/FITC 熒光素標(biāo)記抗6-磷酸山梨脫氫酶抗體IgGBOC-D-谷氨酸5-叔丁酯 98%
SAMDC/AMD1/FITC 熒光素標(biāo)記S-腺苷蛋氨酸脫羧酶抗體IgGBoc-組氨酸 99%
SARS S-protein/FITC 熒光素標(biāo)記非典病表面蛋白S抗體IgGBoc-D-異亮氨酸 98%
SARS putative orflab polyprotein/FITC 熒光素標(biāo)記SARS抗體IgGN-叔丁氧羰-賴氨酸酯 98.5%
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