服務(wù)流程：

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對(duì)原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡(jiǎn)便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。

(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

豬血管緊張素II受體1抗體(ANGⅡR1-Ab)  三(2,2,6,6-四-3,5-庚二酮酸)鐠(III)(＞98%(T))FAM135B蛋白抗體

豬N-酰半乳糖-6-硫酸酯酶(GAS)三(2,2,6,6-四-3,5-庚二酮酸)銪(III)(＞95%(T))“衰老關(guān)鍵蛋白"抗體

豬多肽YY (PYY)三(6,6,7,7,8,8,8-七氟-2,2-二-3,5-辛二酮)鐠(Ⅲ)(>97.0%(T))促卵泡激素受體抗體

豬TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子13(TAF13)(S)-(+)-1,1'-聯(lián)萘-2,2'-雙磷酸氫酯(>97.0%(T))成纖維生長(zhǎng)因子12抗體

豬凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1) (R,R)-(-)-2,3-丁二(>96.0%(GC))成纖維生長(zhǎng)因子14抗體

豬黑素瘤抑制性活性蛋白1(MIA1)  (S,S)-(+)-2,3-丁二(>97.0%(GC))腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體

豬新蝶呤 (Neopterin) (+)-芐硅酸(>98.0%(T))FAM96B蛋白抗體

豬信號(hào)素3A(SEMA3A)(-)-芐硅酸(>98.0%(T))腦胚胎鋅指樣蛋白1抗體

豬維生素D受體(VDR)(-)-樟腦烷酸(>98.0%(T))FAM29蛋白抗體

豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SPD)(R)-(-)-N-(3,5-二酰)-α-MaFF相關(guān)蛋白抗體

豬瘦素受體(LEPR)(R)-(-)-N-(3,5-二酰)-α-甘氨酸(>98.0%(HPLC)(T))凝血因子7抗體

豬防御素α5(DEFα5)(1S,2S)-(-)-1,2-二二(>98.0%(GC)(T))FEM1B抗體

豬端粒酶(TE)(1R,2R)-(+)-1,2-二二(>97.0%(GC)(T))纖維母生長(zhǎng)因子3抗體

豬類粘蛋白2(ORM2) (1R,2R)-(-)-N,N'-二環(huán)己烷-1,2-二(>94.0%(GC))纖維母生長(zhǎng)因子4抗體

豬血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)(1S,2S)-(+)-N,N'-二環(huán)己烷-1,2-二(>98.0%(GC))FRA-1蛋白抗體

豬c-fos (R)-(+)-α-芐異酸酯(>98.0%(GC))精神發(fā)育遲滯相關(guān)蛋白抗體
真鯛虹彩病毒PCR試劑盒Phospho-PKA C (Thr197)  磷酸化蛋白激酶C亞性抗體四 ACS，>99.5% (GC)

PKB/AKT-1  蛋白激酶B（小鼠來(lái)源抗體）四氯烯 CP，97%

PLASTIN3/T Plastin  絲束蛋白T Plastin抗體硫代酸 AR,90.0%

PLC beta 3/Phospholipase C beta 3  磷酯酶Cβ3抗體硫代酸 GR,98%

Phospho-PLC beta3 (Ser537)  磷酸化磷酯酶Cβ3抗體硫代酸 CP,85.0%

Phospho-PLC beta3 (Ser1105)  磷酸化磷酯酶Cβ3抗體3,5,5-己酸 97%

PKC beta 1/2  蛋白激酶C beta 1/2抗體叔丁 HPLC，>99.5%(GC)

phospho-PKC (Thr500)  磷酸化蛋白激酶C(T500)抗體叔丁 GR，≥99.5% (GC)
反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。