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當(dāng)前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>PCR類>>熒光定量PCR試劑盒>> 50次新加坡石斑魚虹彩病毒PCR試劑盒

新加坡石斑魚虹彩病毒PCR試劑盒

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產(chǎn)品型號50次

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-11-20 16:03:35瀏覽次數(shù):109次

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規(guī)格 50次 貨號 YS-P013564
品牌 YSRIBIO
新加坡石斑魚虹彩病毒PCR試劑盒原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
服務(wù)流程:

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

新加坡石斑魚虹彩病毒PCR試劑盒

50次

YS-P013564

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

QQ截圖20191211135002.jpg 

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

豬二氫硫辛酸脫氫酶(DLD)DL-谷氨酰生長因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接頭蛋白2抗體

豬紐蛋白(VCL)DL-脯氨酸G蛋白α亞單位蛋白Q抗體

豬趨化因子樣因子(CKLF)DL-氨酸酯鹽酸鹽生長抑制DNA損傷因GADD45β抗體

豬低分子量角蛋白(CK-LMW)L-谷氨酸5酯生長抑制蛋白22抗體(化控制J蛋白)

豬膜聯(lián)蛋白A2(ANXA2 )  N-酰-DL-亮氨酸G蛋白偶聯(lián)受體39抗體

豬堿性磷酸酶(ALP) N-碳芐氧賴氨酸,N6-Cbz-L-賴氨酸橋尾蛋白抗體

豬不均一核糖核蛋白U (HNRPU)鹽酸艾司洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)半乳糖凝集素8抗體

豬腦素受體(CNR1)鹽酸艾司洛爾糖磷脂酰肌錨定蛋白137抗體

豬胰淀粉酶α2(AMY2) H-Met-OtBu.HCL胰高血糖素樣肽2受體抗體

豬抗胰島素受體抗體(AIRA)  麥芽糖生長休止特定蛋白1抗體

豬白三烯A4水解酶(LTA4H) L-酰γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶輕鏈1抗體

G蛋白β1(GNβ1)L-蘇氨酸酯鹽酸鹽γ1氨丁酸受體α5/GABRα5抗體

豬原鈣黏素β16(PCDHβ16) N-酰-L-色氨酸酯G蛋白激活內(nèi)向通道1抗體

豬角膜鎖鏈蛋白(CDSN)N-酰-DL-色氨酸G蛋白激活內(nèi)向通道3抗體

豬周期素B(CCNB) N-酰-DL-色氨酸G蛋白偶聯(lián)受體48抗體

豬蛋白激酶抑制劑β(PKIβ)L-酪氨酸叔丁酯糖轉(zhuǎn)移酶GLT8D2抗體
新加坡石斑魚虹彩病毒PCR試劑盒SUR1  磺酰脲類藥物受體1抗體四氫氧化銨 AR,25%水溶液

SUMO 1  類泛素蛋白抗體四氫氧化銨 AR,25%溶液

SV2A  突觸泡蛋白2A抗體四氫氧化銨溶液 10%水溶液

Synphilin-1  synphilin-1抗體四氫氧化銨溶液 10%溶液

phospho-Syndecan 4(Ser179)  磷酸化多配體聚糖4(Ser179)抗體四溴化銨 98%

SYK  非受體型酪氨酸蛋白激酶抗體四溴化銨 for ion pair chromatography

Phospho-Syk (Tyr323)  磷酸化非受體型酪氨酸蛋白激酶抗體四氫氧化銨 五水合物 97%

Phospho-Syk (Tyr525/526)  磷酸化非受體型酪氨酸蛋白激酶抗體四溴化銨 99%


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