公司向您推薦大鼠腦動脈血管內皮細胞的詳細說明：

產(chǎn)品描述：提供的原代細胞均來自新鮮組織，提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩(wěn)定。在技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度?？萍继峁┑募毎袠藴实蔫b定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、科技售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。
細胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)：
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養(yǎng)于含10％小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細胞生長特性，在適當?shù)臅r候進行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代：
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細胞，一般按1：2-1：5 稀釋細胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
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實驗操作步驟： 
a．采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。   
b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；

四硫磺酸鈉煌綠（TTB）增菌液基礎苯酸葉醇酯 ≥99%，Kosher3-氨基酸酯鹽酸鹽pUNO1-hMLKLa

溶液酸異戊酯 98%β-胺酸酯鹽酸鹽pUNO1-hMNDA

0.1%煌綠溶液桂酸異酯 98%3-氨基酸pUNO1-hMRE11Aa

無菌四硫磺酸鈉煌綠（TTB）增菌液異戊醛 ≥97%，Kosher酸-1-萘酯pUNO1-hMSK1

EF-18 瓊脂基礎酸異戊酯 99%α-納富妥苯pUNO1-hMSK2a

培養(yǎng)基桂酸異酯 ≥96%, FG7，8-苯并黃酮pUNO1-hMSR1a

新生溶液可可醛 ≥95%，Kosher3-羥基-α-基-L-酪氨酸水合物pUNO1-hMST1

無菌采樣袋/均質袋可可醛 95%乳白蛋白pUNO1-hMUL1

1%堿性蛋白胨水（APW）香酚醚 98%2-酮戊二酸鈉pUNO1-hMYCb

氨芐青麥康凱瓊脂基礎異香酚醚 99%2-酮戊二酸pUNO1-hMYD88

大鼠腦動脈血管內皮細胞正十六烷標準溶液1000mg/L,溶劑:四碳Methyl Linoleate；亞油酸酯魚肉精膏Rat Gsta2(Glutathione S-transferase alpha-2) ELISA Kit

Rat Manf(Mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor) ELISA Kit

苯標準溶液,4000mg/L,,溶劑:四碳Enrofloxacin HCl；鹽酸恩諾沙星海鮮粉Rat Bcl10(B-cell lymphoma/leukemia 10) ELISA Kit

Rat Casp6(Caspase 6) ELISA Kit

姥鮫烷標準溶液1000mg/L,溶劑:四碳cis-9-Octadecenoic acid；油酸混凝土速凝劑Rat Cubn(Cubilin) ELISA Kit

Rat Dgka(Diacylglycerol kinase alpha) ELISA Kit

醇中九種TVOCs混合系列（GSB 07-1986-2005） 套件Letrozole；來曲唑牛肉粉精Rat Maob(Amine oxidase [flavin-containing] B) ELISA Kit

Rat ADH(Antidiuretic Hormone) ELISA Kit

九種TVOCs混合標準品10μg/ml,溶劑:醇Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside；大黃酸-8-O-β-D-葡萄糖苷紅燒Rat Adm(Adrenomedullin) ELISA Kit

Rat ADORA1(Adenosine A1 Receptor) ELISA Kit

九種TVOCs混合標準品100μg/ml,溶劑:醇Imipramine Hydrochloride；咪嗪鹽酸鹽醬油粉末香精Rat ADORA2A(Adenosine A2a Receptor) ELISA Kit

Rat ADORA2B(Adenosine A2b Receptor) ELISA Kit

九種TVOCs混合標準品1000μg/ml,溶劑:醇Ferulic acid；阿魏酸聚合鋁鐵Rat ADORA3(Adenosine A3 Receptor) ELISA Kit

Rat ADRb1(Adrenergic Receptor Beta 1) ELISA Kit

2,4,5-涕酸  分析標準品BaohuosideⅠ；寶藿苷Ⅰ高蛋白高脂肪DDGS飼料Rat ADRβK1(Adrenergic Receptor Beta Kinase 1) ELISA Kit

Rat AGRN(Agrin) ELISA Kit

鑭,無水 99.9% (REO),10目Penicillin G potassium salt；青G鉀/青鉀可再分散性乳膠粉（RDP）Rat AgRP(Agouti Related Protein) ELISA Kit

Rat AhR(Aryl Hydrocarbon Receptor) ELISA Kit

氧化鋱 99.99% metals basisErythromycin；紅鈷基合金粉末Rat Alkaline Phosphatase, Intestinal(ALPI) ELISA Kit

Rat ALP(Alkaline Phosphatase) ELISA Kit

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。