當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>細胞培養(yǎng)>>原代細胞>> 大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞說明書
公司向您推薦大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞說明書的詳細說明:
產(chǎn)品名稱 | 大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞說明書 |
規(guī)格 | 5×105 |
貨號 | YS-X6601 |
產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度??萍继峁┑募毎袠藴实蔫b定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、科技售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
細胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng):
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養(yǎng)于含10%小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5% CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細胞生長特性,在適當?shù)臅r候進行傳代,一般3~4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代:
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液,用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細胞,一般按1:2-1:5 稀釋細胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
?
實驗操作步驟:
a.采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。
b.立即在無菌超凈臺內(nèi)用70%乙醇擦洗整個動物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
木糖賴氨酸脫氧膽鹽(XLD)瓊脂異酸香蘭素酯 ≥98%, FG抗菌素pUNO1-hOCT4
木糖賴氨酸脫氧膽鹽(XLD)瓊脂平板酸香蘭素酯 ≥98%,Kosher黍膠質(zhì)pUNO1-hOPTN
三糖鐵(TSI)瓊脂天然香蘭素 Natural,≥99%, FCC, FG植物細胞分裂素pUNO1-hOSM
三糖鐵(TSI)瓊脂斜面青G鈉 1650 U/mg 4,4-二羥基-6-[10 -羥基- 6 -羰基十一烷基]苯酸內(nèi)酯pUNO1-hOSMR
營養(yǎng)瓊脂(NA)D-青霉胺 99%N-芐氧羰基-D-脯氨酸pUNO1-hOX40
培養(yǎng)基2-過氧化酮 >52%(GC)N-芐氧羰基-D-苯氨酸pUNO1-hOX40La
營養(yǎng)瓊脂平板(NA)2-過氧化酮 CPN-芐氧羰基-D-苯pUNO1-hp19
賴氨酸脫羧酶試驗鄰苯二酸二酯 AR,99.5%N-芐氧羰基-DL-氨酸pUNO1-hp21
氨基酸脫羧酶試驗對照草酰二胺 98%N-芐氧羰基-D-亮胺酸pUNO1-hp27
無菌液體石蠟高嶺土 醫(yī)藥級N-CBZ-D-氨酸pUNO1-hp27mt
大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞說明書氨環(huán)酸 98%Acetate gossypol; 醋酸棉嫩黃Rat CGRP(Calcitonin Gene Related Peptide) ELISA Kit
Rat CGβ(Chorionic Gonadotropin Beta Polypeptide) ELISA Kit
4-(氨基基)苯酸 97%Usnic acid;松蘿酸桔黃Rat CHEM(Chemerin) ELISA Kit
Rat CHRM2(Cholinergic Receptor, Muscarinic 2) ELISA Kit
周效磺胺 96%(−)-Epicatechin gallate/ECG;表兒茶素沒食子酸酯巧克力棕Rat C-jun(c-jun) ELISA Kit
Rat CKLF(Chemokine Like Factor) ELISA Kit
周效磺胺 分析標準品Pristimerin;扁塑藤素亮黑Rat CKLFSF5(Chemokine Like Factor Superfamily 5) ELISA Kit
Rat CKLFSF6(Chemokine Like Factor Superfamily 6) ELISA Kit
1,2-環(huán)己二胺 99%Griseofulvin;灰黃葡萄紫色素Rat CK-MB(Creatine Kinase MB Isoenzyme) ELISA Kit
Rat CKMT1B(Creatine Kinase 1B, Mitochondrial) ELISA Kit
香 natural, ≥98%, FCCSarsasapogenin;菝葜皂苷元果綠Rat CLDN5(Claudin-5) ELISA Kit
Rat c-myc(c-myc Oncogene Product) ELISA Kit
偏硼酸鈣 39-44% B2O3 basis, 31-37% CaO basis, powderPyruvic acid;酮酸大紅Rat CNTN4(Contactin 4) ELISA Kit
Rat CNX(Calnexin) ELISA Kit
八-O-?;?/font>-D-(+)-蔗糖 98%Lutein;葉黃素維生素B6Rat COL1(Collagen Type Ⅰ) ELISA Kit
Rat COL-1α1(Collagen Iα1) ELISA Kit
β-D-葡萄糖五酸酯 98%Sulfamerazine;磺胺基嘧啶鎖陽(鎖陽片)Rat COL1α2(Collagen Type I Alpha 2) ELISA Kit
Rat COL2(Collagen Type Ⅱ) ELISA Kit
曲酸 99%Ursodeoxycholic acid;熊去氧膽酸滅螺安Rat COL3(Collagen Type Ⅲ) ELISA Kit
Rat COL9α1(Collagen Type IX Alpha 1) ELISA Kit
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關企業(yè)負責,儀表網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務必確認供應商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。