服務(wù)流程：

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

豚鼠癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)9--d3-腺嘌呤信號通路Wnt6抗體

豚鼠趨化因子C-C-元配體1(CCL1)β-煙酰腺嘌呤二核苷磷酸, 縮減環(huán)已銨鹽WD重復(fù)膜蛋白61抗體

豚鼠血漿谷胱甘肽過氧化物酶(GPX3) 煙酰1,N6-亞烯腺嘌呤二核苷酸Wnt1信號通路蛋白3抗體

豚鼠膠原酶I(Collagenase I)  β-煙酰腺嘌呤二核苷磷酸,縮減二鹽濕疹血小板減少伴免疫缺陷綜合征相關(guān)蛋白抗體

豚鼠速激肽受體3(TACR3)α-煙酰腺嘌呤二核苷磷酸,縮減二鈉鹽WDR68蛋白抗體

豚鼠粘蛋白20(MUC20)β-NADP-二WDR91蛋白抗體

豚鼠前列腺素E合酶2(PTGES2)紅霉素CP53應(yīng)答因蛋白5抗體

豚鼠肌腱蛋白C(TNC)紅霉素BWD重復(fù)膜蛋白19抗體

豚鼠間隙連接蛋白β1(GJβ1)紅霉素硫酸鹽磷酸化WEE1蛋白抗體

豚鼠質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)紅霉素A二水化合物糖類應(yīng)答元件結(jié)合蛋白ChREBP抗體

豚鼠CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα) N-去紅霉素A腎母瘤蛋白抗體

豚鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)琥紅霉素信號通路Wnt16抗體

豚鼠脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1) 紅霉素A烯WDR23蛋白抗體

豚鼠叉頭框蛋白P3(FOXP3)紅霉素乳糖酸端粒酶卡哈爾體蛋白抗體

豚鼠纖維蛋白原(FBG)脫氫尼索地平信號通路WNT10B抗體

豚鼠硫氧還蛋白結(jié)合蛋白2(TBP2)4-羥尼索地平EBV核蛋白2抗體
副溶血弧菌TRH基因檢測試劑盒（熒光PCR法）Phospho-PAK4 (Ser474)/PAK5 (Ser602)/PAK6 (Ser560) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化p21激活激酶4、5、6抗體IgG5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸酯對鹽 ≥99% (HPLC)

PAK7/PAK5/MBT/FITC  熒光素標(biāo)記抗激活激酶PAK7/PAK5抗體IgG2,2'-聯(lián)喹啉-4,4'-二酸二鈉 98%

-phospho-P70 S6 Kinase beta (Thr228) /FITC  熒光素標(biāo)記抗磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體IgG5-溴-2'-脫氧尿苷 99%

Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr421/Ser424) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體IgG3,5-二羥酸 97%

phospho-P70 S6 Kinase beta (Ser371)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體IgG二硫蘇糖 99%

phospho-STAT1(pThr701)/FITC  熒光素標(biāo)記抗磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體IgG5,5'二硫代雙(2-酸) 98%

phospho-STAT3(pThr705)/FITC  熒光素標(biāo)記抗磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體IgG3,5-二氯-2-羥磺酸鈉 99%

JNK2/FITC  熒光素標(biāo)記氨末端激酶2抗體IgG 3,3'-二氨聯(lián)四鹽酸鹽水合物 98%
反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。