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實驗操作步驟:
a.采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。
b.立即在無菌超凈臺內(nèi)用70%乙醇擦洗整個動物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
公司向您推薦大鼠腸巨噬細胞價格的詳細說明:
產(chǎn)品名稱 | 大鼠腸巨噬細胞價格 |
規(guī)格 | 5×105 |
貨號 | YS-X6594 |
產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在技術(shù)部標(biāo)準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度??萍继峁┑募毎袠?biāo)準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、科技售后服務(wù)標(biāo)準。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng):
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養(yǎng)于含10%小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5% CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細胞生長特性,在適當(dāng)?shù)臅r候進行傳代,一般3~4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代:
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液,用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細胞,一般按1:2-1:5 稀釋細胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
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實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
萘啶酮酸3-羥基酸酯 97%,FG牛種球蛋白pUNO1-hMDC
檸檬酸鐵銨溶液濃馥香蘭素 98%γ-環(huán)糊精pUNO1-hMDK
吖啶黃薄荷酰胺 99%,Kosherβ-谷固醇pUNO1-hMECP2a
萘啶酮酸4-基辛酸 98%β-酰內(nèi)酯pUNO1-hMEFV
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基菠蘿酸酯 99%6,6-二基-2-亞基-二環(huán)[3.1.1]-庚烷pUNO1-hMFN2
培養(yǎng)基香酚 ≥98%, FCC, Kosher, FG酸-2-萘酯pUNO1-hMGAT1
OXA 瓊脂基礎(chǔ)羊油酸 ≥98%,Kosherβ-萘酚紫pUNO1-hMGAT2
OXA 瓊脂添加劑薄荷酰胺 98%β-萘黃酮pUNO1-hMGAT3
含 0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆瓊脂(TSA-YE)酰酸酯 99%2-萘酸pUNO1-hMGAT4Aa
含 0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆肉湯(TSB-YE)2-基酸酯 98%β-N-酰基氨基葡萄糖苷酶pUNO1-hMGAT5A
大鼠腸巨噬細胞價格6-姜 分析標(biāo)準品,≥98%Ginsenoside Rb2;人參皂苷Rb2鼠尾草酸Rat Notch2(Neurogenic locus notch homolog protein 2) ELISA Kit
Rat Gfra1(GDNF family receptor alpha-1) ELISA Kit
染料木苷 from Glycine max (soybean), ≥95% (HPLC)Ginsenoside Rc;人參皂苷Rc殼聚糖醋酸鹽Rat Hsd3b1(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase/Delta 5-->4-isomerase type 1) ELISA Kit
Rat Nfe2l2(Nuclear Factor, Erythroid Derived 2 Like Protein 2) ELISA Kit
番瀉苷C 99%Ethyl Decanoate;癸酸酯葡萄糖Rat Rap1a(Ras-related protein Rap-1A) ELISA Kit
Rat Lppr1(Lipid phosphate phosphatase-related protein type 1) ELISA Kit
鉿粒 99.9% metals basis,1-10mmSorbic acid;山梨酸黃芪總黃酮Rat Grina(Glutamate [NMDA] receptor-associated protein 1) ELISA Kit
Rat Aox1(Aldehyde oxidase) ELISA Kit
鈮粉 99.5%,200目Epimedin A;朝藿定A三七粉Rat Sipa1l1(Signal-induced prolifeRation-associated 1-like protein 1) ELISA Kit
Rat F2rl3(Proteinase-activated receptor 4) ELISA Kit
三基溴硅烷, 含穩(wěn)定劑銅, 98%Epimedin B;朝藿定B甘氨酸鹽酸鹽Rat Nps(Neuropeptide S) ELISA Kit
Rat Ces5a(Carboxylesterase 5A) ELISA Kit
代環(huán)己烷 99%Epmedin C;朝藿定C復(fù)配面包改良劑Rat Metrnl(Meteorin-like protein) ELISA Kit
Rat Slc18a3(Vesicular acetylcholine transporter) ELISA Kit
1,4-二烷 98%Maltotriose;麥芽三糖速凍湯圓改良劑Rat Slc16a1(Monocarboxylate transporter 1) ELISA Kit
Rat ABCB1(Multidrug resistance protein 1) ELISA Kit
六基二硅烷 98%Zileuton;齊留通饅頭改良劑Rat Andpro(Cystatin-related protein 1) ELISA Kit
Rat Sult1e1(Estrogen sulfotransferase, isoform 1) ELISA Kit
三基硅烷 97%AmLodipine Besylate;苯氨地平冷榨椰子油Rat Ste2(Estrogen sulfotransferase, isoform 2) ELISA Kit
Rat Ste(Estrogen sulfotransferase, isoform 3) ELISA Kit
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
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