服務(wù)流程：

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

2,2'-聯(lián)四唑-1,1'-二苯基(洛沙坦雜質(zhì))英文名稱： 1-BromopyreneT凋亡相關(guān)蛋白TDAG51抗體包裝500g

2,2-二基-4-異基-1,3-苯并二茂英文名稱： 4-Bromopyrene蛋白酶調(diào)解因子9抗體包裝25g

2,3,4-三-O-苯酰-泊酚-β-D-葡萄糖苷酸...英文名稱： 1,6-Diaminopyrene胰腺抗體包裝5g

2,3-去亞異基托吡酯英文名稱： 1,3-Diaminopyrene纖溶酶相關(guān)蛋白B2抗體包裝1g

2,3-脫氫辛伐他汀酸鈉鹽英文名稱： 2,7-Di-tert-butylpyrene多聚合酶α/β/γ抗體包裝5g

2,4-二(三基硅烷基)-5-尿嘧啶英文名稱： 1-Nitropyrene含脯氨酸突觸相關(guān)蛋白相互作用蛋白1抗體包裝1g

2,4-二氨基-6-苯基-7-蝶啶英文名稱： 4-Nitropyrene外周蛋白2抗體包裝5g

2-(R)-[1-(R)-(3,5-二(三基)苯基...英文名稱： 2-Aminofluorene區(qū)帶蛋白PZP抗體包裝100mg

2-[(2,6-二)氨基]苯英文名稱： 2-Amino-9-fluorenone蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移酶1β（FTβ）抗體包裝1g

2-（巰基）腺苷 5'-三磷酸四鈉鹽合物英文名稱： 2-Amino-9,9-dimethylfluorene原鈣粘蛋白15抗體包裝250mg

2-氨基-5,6-二-3(4H)-喹唑啉醋酸(阿那格...英文名稱： 9-Bromofluorene原鈣粘蛋白β2抗體包裝1g

2-氨基-6,8-二羥基嘌呤鹽酸鹽英文名稱： 2-Bromofluorene原鈣粘蛋白β4抗體包裝25g

2-氨基-6-羥基-8-巰基嘌呤英文名稱： 2-Bromo-9-fluorenone原鈣粘蛋白γ10抗體包裝5g

2-氨基-6-巰基嘌呤-9-D-核苷合物英文名稱： 2-Bromo-9,9-dimethylfluorene原鈣粘蛋白γA4抗體包裝1g

2-氨基腺苷英文名稱： 2,7-Diaminofluorene原鈣粘蛋白γA2抗體包裝25g
惡性瘧原蟲（PF）檢測試劑盒（熒光-PCR法）CTX(Human cytotoxin) ELISA Kit  人素氧化銪 99.999% metals basis

Alpha-SYN(Human Alpha-Synuclein) ELISA Kit  人α突觸核蛋白鄰氧酸 99%

CA19-9(Human Carbohydrate antigen19-9) ELISA Kit  人糖鏈抗原19-91--3--5-吡唑啉酮 99%

HRD(Human Hirudin) ELISA Kit  人水蛭素氧磷 AR,99.0% (劇品)

Human Tacrolimus-FK506 ELISA Kit  人他克莫司三磷 CP（劇品）

ESA(Human epithelial specific antigen) ELISA Kit  人上皮特異性抗原磷酸酯 98%

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