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產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度??萍继峁┑募毎袠藴实蔫b定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、科技售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
小鼠皮下脂肪細胞 | 5×105 | YS-X6532 |
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細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
培養(yǎng)操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取.
營養(yǎng)瓊脂平板NA全氟辛酸 90%1%馬尿酸鈉Fast-Media® Base Agar
無菌鹽水聚四氟烯微粉 平均粒徑: 5μm營養(yǎng)瓊脂斜面pDUO2-mcs
乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基聚四氟烯濃縮分散液 60 wt %分散液MEE肉湯pDUO-mcs
雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管1,1,2-三氯三氟烷(CFC-113)99.5%2216E液體培養(yǎng)基pMOD2-Blast
伊紅美藍瓊脂EMB1,1,2-三氯三氟烷(CFC-113 for HPLC, ≥99.5%CIN-1添加劑pMOD2-Hygro
伊紅美藍瓊脂平板一氟三氯烷 99.8%ITC肉湯添加劑pMOD2-Neo
乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基乳糖發(fā)酵管氯化膽堿 AR,98%肉湯培養(yǎng)基ApMOD2-Puro
革蘭氏染色液糠醛 AR,99%三糖鐵瓊脂(TSI)pMOD2-Zeo
表面接觸皿糠醛 ACS, 99%綠膿菌素測定用培養(yǎng)基(PDP)pUNO1-mcs purchased with a pUNO1-[gene]
胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基糠醛 standard for GC, ≥99.5% (GC)10%纖維二糖水溶液pUNO1-bDectin1a
小鼠皮下脂肪細胞200μg/ml~2000μg/ml培養(yǎng)皿 100×20MM TC表面 PS(聚苯烯)材質 滅菌 袋裝, 20個/包, 25包/箱醋酸鈉Mouse GRβ(glucocorticoid receptor β) ELISA Kit
Mouse GS(Gelsolin) ELISA Kit
(Na,Mg,K,Ca,NH4+)多元素混合標準溶液400μg/ml:Na;500μg/ml培養(yǎng)瓶(正方斜口) 培養(yǎng)瓶 ,25c㎡,密封蓋,PS材質,直角斜頸 TC表面 袋裝, 20個/包, 25包/箱己二醇Mouse GSK(glycogen synthase kinase) ELISA Kit
Mouse GSTα1(Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit
(As,Bi,Cd,Cu,Cr,Fe,Hg,Mn,Ni,Se,Pb,Zn)多元素混合標準溶液 100濾膜培養(yǎng)瓶 25cm² 直角斜頸 透氣蓋 PS材質 滅菌 袋裝,20個/包,10包/箱左旋α-蒎烯Mouse GSTt1(Glutathione S Transferase Theta 1) ELISA Kit
Mouse GSTt2(Glutathione S Transferase Theta 2) ELISA Kit
(Al,Bi,Fe,Mn,Mo,Sb,Si,Ta,Ti,Zn,Zr)多元素混合標準溶液 100μg/濾膜培養(yǎng)瓶 75cm2,直角斜頸,透氣蓋,PS材質,滅菌,袋裝,5個/包,20包/箱荔枝皮多酚Mouse GTF2H1(General Transcription Factor IIH, Polypeptide 1) ELISA Kit
Mouse Gzms-A(granzyme A) ELISA Kit
100μg/ml凍存管 50個/包, 10包/箱 凍存管 2.0ml 圓底 自立式 外旋密蓋 PP(聚烯)材質 滅菌 袋裝 硅膠墊圈聚季銨鹽-51Mouse HAase(Hyaluronidase) ELISA Kit
Mouse HABP1(Hyaluronan Binding Protein 1) ELISA Kit
100μg/ml凍存管 5.0mL,50個/包,10包/箱 圓底,自立式,外旋密蓋,PP(聚烯)材質,滅菌,袋裝,硅膠墊圈,N-亞胲銨Mouse HB-EGF(Heparin-binding Epidermal Growth Factor-like Growth Factor) ELISA Kit
Mouse HC II(Heparin Cofactor II) ELISA Kit
Bi,Se,Sn,Te,50μg/ml;As,P,Sb,100μg/ml;Fe,Ni,Pb,S,Zn,200μg/培養(yǎng)瓶 75cm2,5個/包,20包/箱 直角斜頸(正方斜口),密封蓋,PS(聚苯烯)材質,滅菌,袋裝,5個/包,20包/箱鄰苯二酸二正酯(DBP)Mouse HCY(Homocysteine) ELISA Kit
Mouse HD1(Histone Deacetylase 1) ELISA Kit
鈦標準溶液 1000μg/ml離心管 15ml,50個/包,10包/箱 密封蓋 PP(聚烯)材質 滅菌(cf 430052 430186)飼料級氧化鎂Mouse HDAC2(Histone Deacetylase 2) ELISA Kit
Mouse HDGF(Hepatoma Derived Growth Factor) ELISA Kit
鎢標準溶液 1000μg/ml離心管 50mL 25個/架,20包/箱 錐形底 平蓋 PP(聚烯)材質 滅菌(cf 430052),25個/架,20包/箱蔗糖脂肪酸酯SE-11Mouse HDL(High Density Lipoprotein) ELISA Kit
Mouse Hepc(Hepcidin) ELISA Kit
錫標準溶液 1000μg/ml培養(yǎng)瓶 175cm2 5個/包,10包/箱, 直角角度頸,密封蓋,PS(聚苯烯)材質,滅菌,袋裝,貝殼粉Mouse HHIP(Hedgehog Interacting Protein) ELISA Kit
Mouse histon-H2b(histon-H2b) ELISA Kit
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C?;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
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溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。