細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

產(chǎn)品描述：提供的原代細胞均來自新鮮組織，提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。科技提供的細胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、科技售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用.

?
培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取.

無菌磷酸鹽緩沖液pH7.2戊二酸酐 98%改良Camp-BAP氏瓊脂添加劑BpUNO1-hB4GALT1a

高鹽察氏培養(yǎng)基5-羥基-2-戊酮  95%TTCpUNO1-hB71

磷酸鹽緩沖液pH7.2烷磺酸酐 98%波爾頓選擇性增菌肉湯添加劑pUNO1-hB72b

無菌磷酸鹽緩沖液pH7.2烷磺酰氯 99.5）改良CCD瓊脂添加劑pUNO1-hB7H3a

無菌磷酸鹽緩沖液pH7.2鄰苯二酰氯 90%哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)pUNO1-hICOSLGa

營養(yǎng)瓊脂NA均苯四酸酐 96%脫纖維羊血pUNO1-hBAD

無菌采樣袋/均質(zhì)袋琥珀酰亞胺 98%改良Skirrow瓊脂添加劑pUNO1-hBAFF

無菌鹽水2,3-二基-1-烯 98%FBP溶液pUNO1-hTNFRSF13C

無菌鹽水2,3-二基-2-烯 98%氧化酶試劑pUNO1-hBAK1

乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基R-對羥基苯氧基酸酯 97%氧化酶試紙片pUNO1-hBAMBI

大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞說明書水質(zhì)鈷標(biāo)樣 濃度范圍:1.01(mg/L)，分析標(biāo)準(zhǔn)品MES buffer(0.1mol/L,pH5.5)金銀花精油Mouse PYGL(Glycogen Phosphorylase, Liver) ELISA Kit

Mouse PYGM(Glycogen Phosphorylase, Muscle) ELISA Kit

氯苯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑：醇MES buffer(0.1mol/L,pH6.0)發(fā)酵豆粕Mouse RARS(Arginyl tRNA Synthetase) ELISA Kit

Mouse RasGAP(Ras GTPase Activating Protein) ELISA Kit

水質(zhì)鎘標(biāo)樣 0.1mg/l，分析標(biāo)準(zhǔn)品 MES buffer(0.1mol/L,pH6.5)鹽酸左旋咪唑Mouse REN(Renin) ELISA Kit

Mouse RUNX2(Runt Related Transcription Factor 2) ELISA Kit

鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L，溶劑：水MES buffer(0.1mol/L,pH8.0)殺蟲環(huán)Mouse S100A10(S100 Calcium-binding Protein A10) ELISA Kit

Mouse S100A11(S100 Calcium Binding Protein A11) ELISA Kit

鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液水質(zhì)總鉻標(biāo)樣,0.447-1.70mg/LDNase/RNase-Free Water（DEPC處理水） 降價巴西莓提取物Mouse S100A6(S100 Calcium Binding Protein A6) ELISA Kit

Mouse S100A7(S100 Calcium Binding Protein A7) ELISA Kit

對基苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液1059mg/L,溶劑:苯DNase/RNase-Free Water（DEPC處理水） 降價桃膠Mouse S1PR4(Sphingosine 1 Phosphate Receptor 4) ELISA Kit

Mouse S1PR5(Sphingosine 1 Phosphate Receptor 5) ELISA Kit

對氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：醇DNase/RNase-Free Water（DEPC處理水） 降價冷凍食品變性淀粉Mouse sCD100(soluble Cluster of differentiation 100) ELISA Kit

Mouse sCD146(Soluble Cluster of Differentiation 146) ELISA Kit

鄰氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑：醇DNase/RNase-Free Water（DEPC處理水） 降價葛根素Mouse SCT(Secretin) ELISA Kit

Mouse SDC4(Syndecan 4) ELISA Kit

水質(zhì)鈣標(biāo)樣 濃度范圍:1.51-14.8(mg/L)，分析標(biāo)準(zhǔn)品 DNase/RNase-Free Water（DEPC處理水） 降價姜黃粉Mouse SDF4(Stromal Cell Derived Factor 4) ELISA Kit

Mouse SDH(Sorbitol Dehydrogenase) ELISA Kit

四氯化碳標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑:醇RNAwait(非凍型組織RNA保存液)蛇床子素Mouse SELL(L-Selectin) ELISA Kit

Mouse SEMA7A(Semaphorin 7A) ELISA Kit
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C?；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。