實(shí)驗(yàn)操作步驟： 
a．采用認(rèn)可的方案處死人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞嚙齒動(dòng)物。   
b．立即在無(wú)菌超凈臺(tái)內(nèi)用70％乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。 
c．用無(wú)菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無(wú)菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無(wú)菌的剪刀和鑷子切開(kāi)腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無(wú)菌的培養(yǎng)皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無(wú)菌的含有無(wú)菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

公司向您推薦大鼠肺泡上皮細(xì)胞價(jià)格的詳細(xì)說(shuō)明：

產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，提供的人源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、科技售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)：
用于檢測(cè)細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10％小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)對(duì)細(xì)胞因子有依賴性的細(xì)胞株時(shí)還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)特性，在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候進(jìn)行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞的傳代：
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液稀釋?xiě)腋〖?xì)胞，一般按1：2-1：5 稀釋細(xì)胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
?
實(shí)驗(yàn)材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)； 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺(tái)；

雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管琥珀酸二酯 98%吲哚醋酸酯紙片pUNO1-hBANF1

無(wú)菌單料乳糖膽鹽發(fā)酵管穿心蓮內(nèi)酯  98%3%過(guò)氧化酶試劑pUNO1-hBAT8

伊紅美藍(lán)瓊脂EMB熊果苷 99%脫纖維羊血pUNO1-hBAXa

伊紅美藍(lán)瓊脂平板扁桃苷 97%50%卵黃乳液pUNO1-hBCA1

乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基扁桃苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>98% 磺胺嘧啶鈉溶液（12mg）pUNO1-hPIK3AP1

革蘭氏染色液溴酸胺  分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%（HPLC)亞硫酸鐵瓊脂pUNO1-hBCL10

無(wú)菌鹽水溴酸胺  98%WILKINS-CHALGREN瓊脂pUNO1-hBCL2a

無(wú)菌鹽水牛蒡子苷元 ≥98% (HPLC)MCP瓊脂pUNO1-hBCL3

MC 培養(yǎng)基牛蒡子苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>98% SC瓊脂基礎(chǔ)pUNO1-hBCLXL

多粘菌素 B 溶液 分析標(biāo)準(zhǔn)品改良克氏雙糖鐵培養(yǎng)基pUNO1-hBclXS

大鼠肺泡上皮細(xì)胞價(jià)格三氯烷標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：醇RNAwait(非凍型組織RNA保存液)司盤(pán)60Mouse sEPCR(Soluble Endothelial Protein C Receptor) ELISA Kit

Mouse SESN1(Sestrin 1) ELISA Kit

對(duì)氯苯標(biāo)準(zhǔn)溶液 用于水分析，1000ug/ml的醇溶液RNAwait(非凍型組織RNA保存液)?；蛆Z去氧膽酸Mouse SESN2(Sestrin 2) ELISA Kit

Mouse SESN3(Sestrin 3) ELISA Kit

鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L，溶劑：1%鹽酸固相RNase清除劑硬脂酸鎂Mouse sgp130(Soluble Glucoprotein 130) ELISA Kit

Mouse SHBG(Sex Hormone-Binding Globulin) ELISA Kit

鎘標(biāo)準(zhǔn)溶液 100mg/L，溶劑：1%硝酸固相RNase清除劑熒光面漆Mouse SHH(Hedgehog Homolog, Sonic) ELISA Kit

Mouse sICAM-1/CD54(Soluble Intercellular Adhesion Molecule 1) ELISA Kit

鈷標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L，溶劑：1%鹽酸液相RNase清除劑苯酸銨Mouse sIgA(Secretory Immunoglobulin A) ELISA Kit

Mouse SIGLEC3(Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 3) ELISA Kit

氯離子標(biāo)準(zhǔn)溶液500mg/L，溶劑：水RNAsaver（RNA長(zhǎng)效保存液）5-降冰片烯-2,3-二羧酰亞胺Mouse sIL-6R(Soluble Interleukin 6 Receptor) ELISA Kit

Mouse SLC(Secondary Lymphoid Tissue Chemokine) ELISA Kit

色度標(biāo)準(zhǔn)溶液 500度，溶劑：1％HClEB染色液 溴化錠   紅色熒光核酸染料   GoldView   gelred  (10000X)鹽酸萬(wàn)古霉素Mouse Slc18a1(Solute Carrier Family 18,Member 1) ELISA Kit

Mouse Slc18a2(Solute Carrier Family 18,Member 2) ELISA Kit

色度標(biāo)準(zhǔn)溶液 500度EB染色液 溴化錠   紅色熒光核酸染料   GoldView   gelred  (10000X)β-羥基-β-基酸鈣Mouse SMN1(Survival Of Motor Neuron 1, omeric) ELISA Kit

Mouse SNCa(Synuclein, Alpha) ELISA Kit

色度標(biāo)準(zhǔn)溶液 500度，溶劑：10％HCl GoldView I型核酸染色劑(10000×)4-羥基二苯酮Mouse SNRPD1(Small Nuclear Ribonucleoprotein D1) ELISA Kit

Mouse SOCS3(Suppressors Of Cytokine Signaling 3) ELISA Kit

鄰硝基氯苯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：醇GoldView II型核酸染色劑(5000×)酮酸鈉Mouse SOD2(Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial) ELISA Kit

Mouse SOD3(Superoxide Dismutase 3, Extracellular) ELISA Kit

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。