參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：結(jié)核桿菌(TB)檢測試劑盒(熒光-PCR法)
產(chǎn)品貨號：YS-P014418

產(chǎn)品規(guī)格：50T

產(chǎn)品分類：PCR檢測試劑盒

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

實驗過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．公司產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1（10pM）               2μl

引物2（10PM）              2μl

Taq酶（2U/μl）            1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至               50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點(diǎn)優(yōu)勢：

1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。

2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。

5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。

鹽酸魯拉西酮英文名稱： Silica gel for column chromatography原鈣粘附蛋白α4抗體包裝1g

英文名稱： Silica gel for column chromatography原鈣粘附蛋白α5抗體包裝25g

米帕明/咪英文名稱： Silica gel for column chromatography原鈣粘附蛋白α9抗體包裝5g

鹽酸羅因英文名稱： Silica gel for column chromatography原鈣粘附蛋白α7抗體包裝25g

鹽酸羅替戈汀英文名稱： Silica gel for column chromatography原鈣粘附蛋白α8抗體包裝5g

鹽酸洛貝林英文名稱： Silica gel for column chromatography絲氨酸蛋白酶10抗體包裝1g

鹽酸美金剛英文名稱： Silicic acid hydrate原鈣粘蛋白12抗體包裝25g

鹽酸美托咪定英文名稱： Silicon monoxide前列腺酸性磷酸酶抗體包裝5g

鹽酸納洛酮英文名稱： Silicotungstic acid hydrate缺陷性分配同源物α抗體包裝1g

鹽酸萘唑啉英文名稱： Silver acetate原鈣粘蛋白1抗體包裝25g

鹽酸帕汀英文名稱： Silver chloride造血干抗原CD133相關(guān)蛋白抗體包裝5g

鹽酸帕洛諾司瓊英文名稱： Silver metavanadate酪氨酸蛋白激酶6/腫瘤激酶抗體包裝100g

鹽酸哌侖西平英文名稱： Silver powder表觀抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白抗體包裝25G

鹽酸哌羅匹隆英文名稱： Sodium 5-nitroguaiacolate原鈣粘蛋白介導(dǎo)的PCDHαC2受體抗體包裝1g

鹽酸哌唑英文名稱： Sodium benzenesulfinate小鼠抗p21激活激酶4抗體包裝250mg
結(jié)核桿菌(TB)檢測試劑盒(熒光-PCR法)Hsp-60(Human Heat Shock Protein 60) ELISA Kit  人熱休克蛋白60氯 AR,99%

HSP gp96(Human Heat Shock Protein glycoprotein 96) ELISA Kit  人熱休克蛋白糖蛋白96氯 99.5%

CT-1(Human cardiotrophln 1) ELISA Kit  人心肌營養(yǎng)素1氯 ACS

CP/CER(Human Ceruloplasmin) ELISA Kit  人銅藍(lán)蛋白氯 standard for GC, ≥99.9% (GC)

HSP-90(Human Heat Shock Protein 90) ELISA Kit  人熱休克蛋白90氯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑：

HSP-70(Human Heat Shock Protein 70) ELISA Kit  人熱休克蛋白70氯標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.117mg/ml，體：異辛烷

HSP-40(Human Heat Shock Protein 40) ELISA Kit  人熱休克蛋白40氯 for HPLC, ≥99.5%

HSP-20(Human Heat Shock Protein 20) ELISA Kit  人熱休克蛋白20硝 99.99%
使用方法：

一、樣品采集：

1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。

2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。

3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。

4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。

一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）

1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。

2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。

4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用

6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。