公司向您推薦小鼠晶狀體上皮細(xì)胞的詳細(xì)說(shuō)明：

產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，提供的人源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、科技售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)：
用于檢測(cè)細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10％小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)對(duì)細(xì)胞因子有依賴性的細(xì)胞株時(shí)還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)特性，在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候進(jìn)行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞的傳代：
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液稀釋?xiě)腋〖?xì)胞，一般按1：2-1：5 稀釋細(xì)胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
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實(shí)驗(yàn)操作步驟： 
a．采用認(rèn)可的方案處死人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞嚙齒動(dòng)物。   
b．立即在無(wú)菌超凈臺(tái)內(nèi)用70％乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。 
c．用無(wú)菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無(wú)菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無(wú)菌的剪刀和鑷子切開(kāi)腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無(wú)菌的培養(yǎng)皿上。   
e．剔除胚胎周?chē)陌?，將胚胎放于無(wú)菌的含有無(wú)菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實(shí)驗(yàn)材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)； 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺(tái)；

肌醇測(cè)定培養(yǎng)基烯菌核利標(biāo)準(zhǔn)溶液10μg/ml,u=2%,溶劑:酮改良山梨醇麥康凱瓊脂添加劑pCpGfree-basic (mSEAP)

麥芽浸粉瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)滅草猛 分析標(biāo)準(zhǔn)品，97%改良EC肉湯(mEC+n)pCpGfree-basic-Lucia

BCYE 瓊脂基礎(chǔ)滅草猛 分析標(biāo)準(zhǔn)品

新生霉素pCpGfree-LacZ

BCYE-Cys 瓊脂二基硅油DC-200 GC,粘度~350 mPa.s, neat(25 °C)氧化酶試紙pCpGfree-Lucia

L-半胱氨酸鹽酸鹽溶液二基硅油DC-200 粘度~10 mPa.s, neat(25 °C)半固體瓊脂pCpGfree-mcs

GVPC 瓊脂基礎(chǔ)二基硅油DC-200 粘度~20 mPa.s, neat(25 °C)MUCAP試劑pCpGfree-mSEAP

GVPC 瓊脂添加劑二基硅油DC-200 粘度~50 mPa.s, neat(25 °C)脫脂奶蔗糖胰蛋白胨瓊脂pCpGfree-OVA

乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基二基硅油DC-200 粘度~100 mPa.s, neat(25 °C)雙抗巧克力瓊脂pCpGfree-promoter (mSEAP)

亮綠乳糖膽鹽培養(yǎng)液二基硅油DC-200 粘度~200 mPa.s, neat(25 °C)膽汁液態(tài)培養(yǎng)基pCpGfree-promoter-Lucia

品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基二基硅油DC-200 粘度~500 mPa.s, neat(25 °C)酵母粉瓊脂pCpGrich-mcs

小鼠晶狀體上皮細(xì)胞鐠標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mL，基體：10%HCl培養(yǎng)瓶(黑蓋三角斜口)  細(xì)胞培養(yǎng)瓶，25cm2，直角角度頸，聚酯蓋，PS（聚苯烯）材質(zhì)，20個(gè)/包，25包/箱阿齊沙坦Mouse ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1) ELISA Kit

Mouse ECF/CCL11(Eosinophil Chemotactic Factor) ELISA Kit

酚標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlM199羥基-γ-環(huán)糊精Mouse ECM1(Extracellular Matrix Protein 1) ELISA Kit

Mouse EGR1(Early Growth Response Protein 1) ELISA Kit

磷酸根標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlEppendorf 移液器 （整只消毒） 0.5-5mL二苯基磷酸Mouse EGR2(Early Growth Response Protein 2) ELISA Kit

Mouse EL(Endothelial lipase) ELISA Kit

釕標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlEppendorf 移液器 (整支消毒) 0.1-2.5ul根皮苷Mouse ELN(Elastin) ELISA Kit

Mouse EMILIN1(Elastin Microfibril Interface Located Protein 1) ELISA Kit

銠標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlEppendorf 移液器 （整支消毒） 0.5-10ul2-氨基咪唑硫酸鹽Mouse ENA-78(Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78) ELISA Kit

Mouse EPCAM(Epithelial Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit

銣標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlEppendorf 移液器 (整支消毒) 20-200ul阿佐酰胺Mouse ERN1(Endoplasmic Reticulum To Nucleus Signalling 1) ELISA Kit

Mouse ERα(Estrogen Receptor Alpha) ELISA Kit

錸標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlEppendorf 移液器 (整支消毒) 2-20ul環(huán)十五酮Mouse ERβ(Estrogen Receptor Beta) ELISA Kit

Mouse ES(Endostatin) ELISA Kit

二氧化硅標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlEppendorf 移液器 (整支消毒) 10-100ul赤霉素Mouse F II(coagulation factor II) ELISA Kit

Mouse F XIII B(Coagulation Factor XIII B Polypeptide) ELISA Kit

鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlEppendorf 移液器 (整支消毒) 100-1000ul酚酞Mouse FASL/Faslg(Factor Related Apoptosis Ligand) ELISA Kit

Mouse Fbg(Fibrinogen) ELISA Kit

銀標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlDMEM（低） Gibco原裝番茄紅素Mouse FBXO32(F-Box Protein 32) ELISA Kit

Mouse FDP(Fibrinogen Degradation Product) ELISA Kit

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。