服務(wù)流程：

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

雞VI型膠原α3(COL6α3) PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgG

雞16α羥雌酮1(16-α OHE-1) 生物素標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

雞質(zhì)金屬蛋白酶原13 (Pro-MMP-13)辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

雞鈣周期蛋白結(jié)合蛋白(CACYBP)羅丹明標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

雞酪氨酸酶(TYR)FITC標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

雞α1抗胰蛋白酶(α1-AT)Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

雞著絲粒蛋白B(CENPB) Cy3標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

雞熱休克蛋白60(HSP-60/HSPD1) Cy5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

雞核心蛋白聚糖(DCN)Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

雞肌球蛋白重鏈10(MYH10) Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

雞主要穹窿蛋白(MVP)Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

雞單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)膠體金標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

雞腦環(huán)指蛋白(BFP)堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的羊抗大鼠IgG

雞酸性成纖維生長因子(AFGF/FGF1)膠體金標(biāo)記的羊抗大鼠IgG

雞多藥耐藥相關(guān)蛋白1(MRP1)FITC標(biāo)記的羊抗大鼠IgG

雞骨成型蛋白10(BMP-10) 辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗大鼠IgG
瘧原蟲檢測試劑盒(熒光PCR法)Tuberin/TSC2/FITC  熒光素標(biāo)記馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgGFMOC-S-三-L-半胱氨酸五氟酯  98%

Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr320) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgGN-Fmoc-S-三-D-半胱氨酸  98%

Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1387)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgGFMOC-L-谷氨酰五氟酯  98%

Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgGN-α-Fmoc-N-γ-三游-L-谷氨酸五氟酯  97%

Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr1571)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgGN-Fmoc-N'-三-D-谷氨酰 98%

Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgG芴氧羰-L-谷氨酸 1-叔丁酯 98%

VTG/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗魚、青鳉魚卵黃蛋白原抗體IgGN-[(9H-芴-9-氧)羰]-L-谷氨酸-5-叔丁-1-五氟酯 98%

Tumstatin/Col4a3/FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤抑素抗體IgGFmoc-His(MMt)-OH 98%