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當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>PCR類>>熒光定量PCR試劑盒>> 50次腮腺炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
規(guī)格 | 50次 | 貨號(hào) | YS-P013493 |
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品牌 | YSRIBIO |
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐
的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:腮腺炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):YS-P013493
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.公司產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
大鼠核因子κB2(NFκB2)西瑪津(標(biāo)準(zhǔn)品)胎球蛋白A
大鼠V-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病癌因同源物B (RELB)西瑪津標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=5%)叉頭蛋白L2抗體
大鼠平足蛋白(PDPN)氟蟲(標(biāo)準(zhǔn)品)叉頭相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子3抗體
大鼠降鈣素原(PCT) 五氯標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%,體:)鐵蛋白抗體
大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 (ACE)喹硫磷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%)FMS樣酪氨酸激酶3配體抗體
大鼠纖調(diào)蛋白(FMOD) 二氯喹啉酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%)堿性成纖維生長因子9抗體
大鼠非神經(jīng)元性烯化酶(NNE) 三氯化錫(標(biāo)準(zhǔn)品)原癌因酪氨酸蛋白激酶FES抗體
大鼠環(huán)腺苷二磷酸核糖水解酶(cADPRH/CD38)標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%)成纖維生長因子16抗體
大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM) 標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%)成纖維激活蛋白α抗體
大鼠蛋白(NPHN)間三酚標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:)Fas相關(guān)磷酸酶1抗體
大鼠酸性成纖維生長因子(AFGF/FGF1)威標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=4%)葉酸受體4抗體
大鼠成纖維生長因子21(FGF21)吡嘧磺隆(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%)Wnt信號(hào)受體蛋白抗體
大鼠成纖維生長因子19(FGF19)草(分析標(biāo)準(zhǔn)品,97.5%)磷酸化載脂蛋白A1抗體
大鼠成纖維生長因子23(FGF23)草標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)磷酸化載脂蛋白A1抗體
大鼠成纖維生長因子受體1(FGFR1) 殘殺威標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=4%)磷酸化堿性成纖維生長因子受體1抗體
大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)莠定(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%)脂肪酸酰水解酶1抗體
腮腺炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒P2Y1R/P2ry1 P2Y1受體抗體N,N'-二環(huán)己-4-嗎啉脒 98%
P2Y4R/P2Ry4 P2Y4受體抗體DNA酶 ≥300 Kunitz units/mg protein
P311 protein 神經(jīng)再生相關(guān)蛋白抗體3,3'-二氨聯(lián) 99%
p38MAPK/MAPK14 絲裂原活化蛋白激酶p38抗體3,3'-二氨聯(lián) 97%
phospho-p38(Thr180/Tyr182) 磷酸化-絲裂原活化蛋白激酶p38抗體2,7-二溴芴酮 96%
phospho-p38 MAPK/MAPK14 (Thr180/Tyr182) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶p38抗體2,6-二氯酚靛鈉鹽 AR
MKK3 絲裂原活化蛋白激酶MKK3抗體3,5-二氯-2-羥磺酸鈉 99%
Phospho-MKK3 (Ser189)/MKK6 (Ser207) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗體 3,3'-二氨聯(lián)四鹽酸鹽水合物 98%
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