服務(wù)流程：

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

雞骨成型蛋白15(BMP-15) PE標(biāo)記的小鼠抗人IgG

雞腺苷脫氨酶(ADA)  Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗人IgG

雞抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA) 生物素標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG

雞鋅結(jié)合α2-糖蛋白1(αZGP1)PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc

雞胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)PE-Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc

雞成纖維生長因子受體3(FGFR3) PE-Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc

雞趨化因子CCL3樣蛋白1(CCL3L1)PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc

雞前列腺素F2α(PGF2α) 生物素標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈

雞絲氨酸蛋白酶(PRSS) Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗猴IgM

雞白分化抗原CD97(CD97) PE標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈

雞腦型肌酸激酶(CKB) PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈

雞G蛋白偶聯(lián)受體37(GPR37)Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈

雞白介素9(IL-9)Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈

雞聚集蛋白聚糖(AGC) PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈

雞抗中性粒彈性蛋白酶抗體(ANEA)FITC標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc

雞補體成分2(C2)  辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈
鉤端螺旋體檢測試劑盒（熒光PCR法）TRADD/FITC  熒光素標(biāo)記有死亡區(qū)的腫瘤壞死因子受體1相關(guān)蛋白抗體IgGFmoc-L-蘇氨酸 BR

TP I /FITC  熒光素標(biāo)記拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體IgGFmoc-L-天冬酰 BR

TRAF1/Biotin   生物素化腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗體Fmoc-L-谷氨酰 BR

TRAF1/FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗體IgG芴氧羰酰 99%

TRAF2/TNF-R2 /FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗體IgGN-酰-L-硫氨酰-L-白氨酰-L氨酸 97%

TRAF3/CD40bp /FITC  熒光素標(biāo)記CD40結(jié)合蛋白/CD40受體相關(guān)因子1抗體IgGN-酰-L-蛋氨酸  97%

TRAF6 /FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體IgGFmoc-L-烯甘氨酸 98%

TP-1/TEP1/FITC  熒光素標(biāo)記端粒酶相關(guān)蛋白1抗體IgG芴氧羰酰D-Β環(huán)己氨酸 98%
反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。