服務(wù)流程：

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對(duì)原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡(jiǎn)便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

大鼠紅衍生核因子2樣蛋白2(NFE2L2)N-亞硝二正(標(biāo)準(zhǔn)品)磷酸化雌激素受體α抗體

大鼠尿激酶型纖溶酶原激活因子(PLAU/uPA)(標(biāo)準(zhǔn)品)磷酸化真核翻譯起始因子4B抗體

大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)2-戊酮(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析,≥99.8%(GC))真核翻譯起始因子4B抗體

大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)3-戊酮(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析,≥99.5%(GC))磷酸化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體

大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)二十五烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC))磷酸化上皮癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體

大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)正辛烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.7%(GC))磷酸化真核翻譯起始因子4G抗體

大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/KDR)二氯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析,≥99.99%(GC))表皮生長(zhǎng)因子受體5抗體

大鼠血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)1,4-二氧六環(huán)(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.9%(GC))電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽/黃素蛋白抗體

大鼠血管活性腸肽(VIP)3-1,2-標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/g,體：酸酯)鈉通道蛋白α ENaC

大鼠遲現(xiàn)抗原(VLA)環(huán)己烯(分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.7% (GC))轉(zhuǎn)錄因子E2F8抗體

大鼠V-Fos FBJ骨髓瘤病癌因同源物(FOS)9,10-二蒽(標(biāo)準(zhǔn)品)內(nèi)皮單核激活肽2抗體

大鼠V-Ha-Ras Harvey肉瘤病癌因同源物(HRAS)3,5-二酚(標(biāo)準(zhǔn)品)外質(zhì)蛋白2抗體

大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)二環(huán)己(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC))上皮膜蛋白3抗體

大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(VF)二并噻吩(標(biāo)準(zhǔn)品)膜蛋白EVC2抗體

大鼠維生素D結(jié)合蛋白(DBP)9,10-二蒽(標(biāo)準(zhǔn)品)哺乳動(dòng)物室管膜相關(guān)蛋白1抗體

大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/VWFCP)反式-1,2-二氯烯(標(biāo)準(zhǔn)品)內(nèi)皮粘附分子抗體
巴爾通體通用染料法熒光定量PCR試劑盒Phospho-NMDAR2B (Tyr1070)  磷酸化谷氨酸受體2B抗體二溴化鈀 Pd 40 %

Phospho-NMDAR2B (Tyr1472)  磷酸化谷氨酸受體2B抗體氯鈀酸 Pd 26.2%

NR2C/NMDAR2C  谷氨酸受體2C抗體氯化鈀  Pd 59-60%

NR2D/NMDAR2D  谷氨酸受體2D抗體氯鉑酸 98%

N-Ras  原癌因抗體硝酸鈀 Pd 18.09 wt. % in nitric acid

NR1D1/REV-ERB alpha  核受體Rev-Erbα抗體硝酸鈀(II) 水合物 Pd ≥39.0%

Phospho-REV-ERB alpha (Ser55/59)  磷酸化核受體Rev-Erbα抗體氫氧化鈀 AR,99.99%

Nrf2  核因子2相關(guān)因子2抗體氫氧化鈀 20% Pd
反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。