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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>PCR類>>熒光定量PCR試劑盒>> 50次非洲馬瘟病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

非洲馬瘟病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產品型號50次

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-11-19 16:50:06瀏覽次數:123次

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規(guī)格 50次 貨號 YS-P013366
品牌 YSRIBIO
非洲馬瘟病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環(huán)擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
服務流程:

公司產品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

產品名稱

規(guī)格

貨號

非洲馬瘟病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

50次

YS-P013366

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

QQ截圖20191211135002.jpg 

PCR反應的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

反應五要素:

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

小鼠膽固酯轉移蛋白(CETP)3-苯酸(>98%,BR)幾丁質酶結構域蛋白1抗體

小鼠膽堿磷酸甘油酯(PC/CPG) 叔丁基-4-羥基苯甲(>98%,BR)嵌合蛋白2/β2-chimaerin抗體

小鼠生長停滯特異性蛋白6(Gas6)4,4'-聯吡啶(>98%,BR)幾丁質酶1抗體

小鼠硫酸軟骨素(CS)4,4-二羥基二苯砜(>98%,BR)白抗原CD97 alpha 抗體

小鼠絨毛膜促性腺激素(CG)4,5-二氯熒光素(>98%,BR)緊密連接蛋白2抗體

小鼠染色盒同源物3(CBX3)4-溴異喹啉(>98%,BR)緊密連接蛋白7抗體

小鼠染色質區(qū)解旋酶DNA結合蛋白3(CHD3)對溴苯氧乙酸(>95%,Ind Grade)2號染色體開放閱讀框53抗體

小鼠染色質區(qū)解旋酶DNA結合蛋白5(CHD5)對基苯甲酸(>98%,BR)2號染色體開放閱讀框54抗體

小鼠睫狀神經營養(yǎng)因子(CNTF) 對乙氧基苯甲(>98%,BR)2號染色體開放閱讀框56抗體

小鼠順鉑耐性相關過表達蛋白(CROP)4-羥基(>98%,BR)2號染色體開放閱讀框61抗體

小鼠C-jun  4-苯甲酸(>98%,BR)癌相關抗原抗體

小鼠克拉拉蛋白(CC17)對甲苯(>98.5%,BR)分裂周期相關蛋白4抗體

小鼠白分化抗原3(CD3)對甲氧基苯乙酮(>98%,BR)色素b5抗體

小鼠白分化抗原4(CD4)4-甲氧基酚(>98%,BR)鈣粘蛋白相關的神經受體2抗體

小鼠白分化抗原19(CD19)對甲基肉桂酸(>98%,BR)1號染色體開放閱讀框186抗體

小鼠白分化抗原30(CD30)4-甲基傘形酯-N-乙酰-b-D-氨基半乳糖苷(>98%,BR)CXC趨化因子16抗體
非洲馬瘟病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒GDF8  羊抗生長分化因子8/肌肉抑制素抗體2,5-二氯噻吩 98%

GDF-9  生長分化因子9抗體3,4-二甲氧基噻吩 97%

GDNF  膠質源性神經營養(yǎng)因子抗體3-甲氧基噻吩 98%

Gelsolin  凝溶膠蛋白抗體2-甲氧基噻吩 99%

GFAP  膠質纖維酸性蛋白抗體2-硝基噻吩 98%

GFP  綠色熒光蛋白(免疫組化用抗體)四溴噻吩 99%

GFP  綠色熒光蛋白抗體噻吩-2,3-二甲 98%

GFP  綠色熒光蛋白抗體鹽酸胍 分子生物學級,99.5%


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