服務(wù)流程：

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對(duì)原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡(jiǎn)便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。

(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

兔巨噬集落激因子受體(MCSFR)2-(羥)-18-冠6-(>93.0%(GC))磷酸化Src原癌因抗體

兔V-Myc骨髓瘤病癌因同源物(MYC)4'-并-15-冠-5-(>99.0%(GC))STAC2蛋白抗體

兔信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子5A(STAT5A)4'-并-18-冠-6-(>97.0%(GC))轉(zhuǎn)錄因子SOX30抗體

兔白介素3介導(dǎo)核因子(NFIL3)1,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷(>98.0%(T))13號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框32抗體

兔τ-蛋白激酶1(τPK1)1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷三鹽酸鹽(>98.0%(N)(T))線粒體相關(guān)富含半胱氨酸蛋白抗體

兔神經(jīng)絲蛋白3(NEF3)1,4,8,12-四氮雜環(huán)十五烷(>97.0%(T))跨膜接頭蛋白SIT抗體

兔髓樣前體抑制因子2(MPIF2)1,5,9-三氮雜環(huán)十二烷(>90.0%(GC))SKAP55蛋白抗體

兔纖維蛋白原α(FGα)1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷(>98.0%(GC))沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白2抗體

兔激肽原1(KNG1) 1,4,7--1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷(含穩(wěn)定劑碳酸氫鈉)腫瘤/抗原11.2抗體

兔結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF) 1,4,8,11-四硫代環(huán)十四烷(>98.0%(GC))平滑肌蛋白抗體

兔半乳凝集素7(GAL7)1,4,7-三硫雜環(huán)壬烷(>98.0%(GC))SHROOM1蛋白抗體

兔表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)1,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷-1,4,8,11-四酸四酯(>97.0%(GC))磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體

兔解整合素金屬蛋白酶10(ADAM10)  1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7-三酸三叔丁酯(>93.0%(N))SCK蛋白抗體

兔素相關(guān)蛋白A(CAPA)  1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四酸三叔丁酯(>97.0%(T))磷酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體

兔REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)4-叔丁杯[8]芳烴(>98.0%(HPLC))精氨酸結(jié)合蛋白2抗體

兔賴(lài)氨酰氧化酶樣蛋白4(LOXL4)4-叔丁杯[4]芳烴(>98.0%(HPLC))唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素1抗體
腸道病毒68型檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）TPSB2/Tryptase Beta2/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠肥大類(lèi)胰蛋白酶β2IgG3-雙(2-羥)氨-2-羥磺酸 超純級(jí)

MCT1/FITC  熒光素標(biāo)記單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體IgG麥芽三糖，水合 95%

MDM2/FITC  熒光素標(biāo)記雙微體2癌因抗體IgG藍(lán)四氮唑 超純級(jí)

Phospho-MDM2 (Ser166) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化雙微體2癌因抗體IgGCAPSO單鈉鹽 99%

Mdr-1/FITC  熒光素標(biāo)記多藥耐藥蛋白抗體IgG3-(環(huán)已)-1-磺酸 ≥98.0%

Measles virus of fusion protein/FITC  熒光素標(biāo)記抗麻疹病抗體IgG3-(環(huán)己)-1-磺酸 超純級(jí)

MEF2A/FITC  熒光素標(biāo)記肌增強(qiáng)因子2抗體IgG3-(環(huán)已)-2-羥-1- 99%

Phospho-MEF2A (Thr312) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化肌增強(qiáng)因子2抗體IgG3-(環(huán)已)-2-羥-1- 99.5%
反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。