參數(shù)規(guī)格：
產品名稱：山羊CYTB基因檢測試劑盒(熒光-PCR法)
產品貨號：YS-P014496

產品規(guī)格：50T

產品分類：PCR檢測試劑盒

產品運輸：低溫運輸

產品保存：-20℃保存

產品有效期：一年

產品特點：本產品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。

實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．公司產品僅用于科研對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1（10pM）               2μl

引物2（10PM）              2μl

Taq酶（2U/μl）            1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至               50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢：

1.   特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。

2.   重現(xiàn)性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性：該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。

5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。

酪氨酸羥化酶(TH)檢測試劑盒英文名稱：TH ELISA Kit過氧化物酶?；o酶A氧化酶2抗體包裝25g

跨膜蛋白97(TMEM97/MAC30)檢測試劑盒英文名稱：TMEM97/MAC30 ELISA Kit膽固酰基轉移酶1抗體包裝5g

克拉拉細胞蛋白(CC16)檢測試劑盒英文名稱：CC16 ELISA Kit磷酸化間變型瘤激酶抗體包裝1g

可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sTRAIL)檢測試劑盒英文名稱：sTRAIL ELISA Kit磷酸化ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體包裝5g

可溶性血小板內皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)檢測試劑盒英文名稱：sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit磷酸化有絲分裂激酶B/C抗體包裝1g

可溶性血栓調節(jié)蛋白(sTM)檢測試劑盒英文名稱：sTM ELISA Kit磷酸化腺泡Acinus蛋白抗體包裝25g

可溶性血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)檢測試劑盒英文名稱：sLOX-1 ELISA Kit磷酸化腎上腺素能受體β2抗體包裝5g

可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)檢測試劑盒英文名稱：sEPCR ELISA KitAPS抗體包裝25g

可溶性血管內皮生長因子受體1(sVEGF R1/sFlt1)檢測試劑盒英文名稱：sVEGF R1/sFlt1 ELISA Kit激活素受體樣激酶1抗體包裝5g

可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)檢測試劑盒英文名稱：sICAM-1 ELISA Kit激活素A受體1B抗體包裝100ml

可溶性髓系細胞觸發(fā)受體-1(sTREM-1)檢測試劑盒英文名稱：sTREM-1 ELISA Kit磷酸化雄受體抗體包裝25ml

可溶性瘦素受體(sLR)檢測試劑盒英文名稱：sLR ELISA Kit磷酸化A-Raf抗體包裝5ml

可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)檢測試劑盒英文名稱：sLOX-1 ELISA Kit?；拾泵擋Ｃ?抗體包裝100ml

可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)檢測試劑盒英文名稱：sMHC-2 ELISA Kit脂肪特異性粘附分子抗體包裝1g

可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)檢測試劑盒英文名稱：sMHC-1 ELISA Kit腺相關病5抗體包裝5g
山羊CYTB基因檢測試劑盒(熒光-PCR法)Apo-E ELISA Kit  大鼠載脂蛋白E3-(三氟氧)酚 98%

omentin ELISA Kit  大鼠網膜素4-氨-2-氯吡啶 98%

OFQ/N ELISA Kit  大鼠孤腓肽2-氯-4-吡啶  97%

PP ELISA Kit   大鼠蛋白磷酸酶1,3,5-酸 98%

TrxR ELISA Kit  大鼠硫氧還蛋白還原酶4-烯吡啶 96%

Trx ELISA Kit  大鼠硫氧化還原蛋白L-谷氨酰 99%

Collagenase II ELISA Kit  大鼠膠原酶II 98%

TREM-1 ELISA Kit  大鼠髓系觸發(fā)受體-1二二二丁 99%
使用方法：

一、樣品采集：

1、食品樣品：樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。

2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。

3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。

4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。

一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）

1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。

2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。

4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用

6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。