服務流程：

公司產品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

反應五要素：

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

組成及試劑配制:

1、酶標板：一塊（96孔）

2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

PCR反應的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

小鼠鳥氨酸脫羧酶(ODC)偶氮胂 I鈣粘蛋白14抗體

小鼠孤腓肽(OFQ/N) 堿性品紅(生物染色級)鈣激活氯離子通道蛋白3抗體

小鼠核因子κB抑制蛋白α(IκBα)堿性品紅(分析標準品)CD200受體抗體

小鼠骨鈣素(OC/BGP)溴甲酚綠彈性蛋白酶1抗體

小鼠破骨相關受體(OSCAR)溴百里香酚藍干生長因子受體/表面分化抗原抗體

小鼠破骨分化因子(ODF) 溴甲酚紫CD99樣蛋白2抗體

小鼠骨粘連蛋白(ON)溴甲酚紫(98%)鈣粘蛋白相關蛋白CTNNA3抗體

小鼠骨保護素配體(OPGL)鉍試劑Ⅱ(CP)緊密連接蛋白15抗體

小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)鉍試劑Ⅱ(98%)緊密連接蛋白12抗體

小鼠糖抗原125(CA125)鈹試劑ⅡCHIC2蛋白抗體

小鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIκBα)溴鄰苯三酚酸化周期檢測點激酶1抗體

小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)溴甲酚綠鈉磷酸化周期檢測點激酶2抗體

小鼠絲裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)鹽酸副品紅酸化周期檢測點激酶2抗體

小鼠胰多肽(PP)二苯磺酸鋇(CP)磷酸化周期檢測點激酶2抗體

小鼠甲狀旁腺素(PTH)二苯磺酸鋇(98%)磷酸化周期檢測點激酶2抗體

小鼠甲狀旁腺素受體2(PTHR2)燦爛黃遺傳性脈絡膜缺乏癥相關蛋白抗體
狂犬病病毒通用RT-PCR試劑盒HSD11B2/HSD2  羥基類固脫氫酶11β2抗體羅丹明6G AR

HSP20  熱休克蛋白-20抗體玫瑰酸 Indicator

HSP22  熱休克蛋白-22抗體蘇丹Ⅳ AR

HSP27  熱休克蛋白-27抗體蘇丹Ⅳ 分析標準品，≥96.0% (HPLC)，用于食品分析

Phospho-HSP27 (Ser78)  磷酸化熱休克蛋白27抗體蘇丹II Biological stain

Phospho-HSP27 (Ser82)  磷酸化熱休克蛋白27抗體蘇丹II 90%

Phospho-HSP27 (Ser15)  磷酸化熱休克蛋白27抗體蘇丹 分析標準品

HSP60  熱休克蛋白-60抗體蘇丹 高純級