服務(wù)流程：

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

豬生長調(diào)節(jié)致癌因β(GROβ)  二氫睪酮,雄諾龍Hib酰輔酶A水解酶抗體

豬狀腺激素反應(yīng)因(THRSP)多拉菌素腫瘤異?；鞍?抗體

豬早期生長應(yīng)答蛋白4(EGR4)3,3,5-三-L-狀腺原氨酸，塞羅寧腫瘤異?；鞍?抗體

豬FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L) Corylifol A(標(biāo)準(zhǔn)品)缺氧誘導(dǎo)因子脯氨酰羥化酶4抗體

豬谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)  溴芬酸鈉人內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病膜糖蛋白2抗體

豬黏膜地址素黏附分子(MAdCAM1)溴芬酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Beta氨己糖苷酶beta亞蛋白B鏈抗體

豬信號(hào)素7A(SEMA7A)鹽酸氟哌噻噸HEXIM2蛋白抗體

豬內(nèi)皮素受體B(ETRB)茶多酚;綠茶提取物3'-5'外切酶1蛋白抗體

豬白介素11(IL-11)四氫姜黃素 型肝炎病NS5B抗體

豬B淋巴激活抗原B7-2(LAB7-2/CD86)管花苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)缺氧誘導(dǎo)因1C蛋白抗體

豬心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白C(MYBPC3) 2’-酰毛蕊花糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)HEG同源蛋白1抗體

豬生存素(Surv)2-[2-(2,2,2-三氟氧)氧]溴 人腫瘤抑制蛋白抗體

豬泛素結(jié)合酶E2C(UBE2C)  吡咯喹啉醌;維生素QHemk轉(zhuǎn)移酶家族1號(hào)蛋白抗體

豬甘露糖受體C2 (MRC2) 吡咯喹啉醌二鈉鹽;維生素P鈉鹽Hemk轉(zhuǎn)移酶家族2號(hào)蛋白抗體

豬凝血因子Ⅸ(F9)鹽酸右美托咪定HEN1轉(zhuǎn)移酶同源蛋白1抗體

豬信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子4(STAT4)地夫可特缺氧誘導(dǎo)因2蛋白抗體
猴病毒40 探針法熒光定量PCR試劑盒VWF  血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體纖維素 1500mPa.s

V.cholera Ogawa  01群稻葉型霍亂弧菌抗體纖維素 40000mPa.s

V.cholera Ogawa  01群小川型霍亂弧菌抗體纖維素 100000mPa.s

WEE1 protein  WEE1蛋白抗體羧纖維素 M.W. 700000 (DS=0.9) ,2500 - 4500mPa.s

Phospho-Wee1 (Ser642)  磷酸化WEE1蛋白抗體羧纖維素 M.W. 250000 (DS=1.2) ,1500-3100mPa.s

WNK1  賴氨酸缺陷型蛋白激酶1抗體羧纖維素 M.W. 250000 (DS=0.9) ,1500-3100mPa.s

Phospho-WNK1 (Thr60)  賴氨酸缺陷型蛋白激酶1抗體羧纖維素 M.W. 250000 (DS=0.7) ,1500-3100mPa.s

WNK4  WNK4抗體羧纖維素 M.W. 90000 (DS=0.7) ,50-100mPa.s
反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。