特點優(yōu)勢：

1.   特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。

2.   重現(xiàn)性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性：該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。

5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐

的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
參數規(guī)格：

產品名稱：牛呼腸孤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
產品貨號：YS-P013534

產品規(guī)格：50次

產品分類：PCR檢測試劑盒

產品運輸：低溫運輸

產品保存：-20℃保存

產品有效期：一年

產品特點：本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。

實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．公司產品僅用于科研對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1（10pM）               2μl

引物2（10PM）              2μl

Taq酶（2U/μl）            1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至               50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

一、樣品采集：

1、食品樣品：樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。

2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。

3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。

4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。

一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）

1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。

2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。

4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用

6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

豬高爾蛋白73(GP-73) AEBSF絲氨酸抑制劑脊髓性肌癥蛋白Gemin4抗體

豬染色質區(qū)解旋酶DNA結合蛋白3(CHD3)AEBSF(進分)脊髓性肌癥蛋白Gemin5抗體

豬內凝集蛋白1(ITLN1)鹽酸貝他定(進口)脊髓性肌癥蛋白Gemin7抗體

豬質衍生因子1(SDF-1/CXCL12)鄰菲啰啉鹽酸鹽，一水GTP結合絲裂原誘導T蛋白抗體

豬內質網核信號1(ERN1)膦酰二肽鈉染色體卷曲螺旋域包含蛋白1抗體

豬硫氧還蛋白結合蛋白2(TBP2)癸喃葡萄糖;癸吡喃葡萄糖苷脊髓性肌癥蛋白Gemin6抗體

豬血小板親和蛋白2(PKP2)德羅特韋(GSK-1349572,DTG)磷酸化膠質纖維酸性蛋白抗體

豬巨噬趨化因子(MCF) 十二烷吡喃葡萄糖苷；月桂酰喃葡萄糖自主生長因子GFI1抗體

豬G補綴FHA域血管生成因子1(AGGF1)羥纖維素(20000~30000 mpa.s)G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體

豬谷胱甘肽S轉移酶ω1(GSTω1)羥纖維素(5500-6500 mpa.s)γ-銜接蛋白相關蛋白1抗體

豬免疫球蛋白G Fc段結合蛋白(FcγBP) 羥纖維素(40~60 mpa.s)γ-銜接蛋白相關蛋白2抗體

豬VII型膠原(COL7) 異-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)γ-銜接蛋白相關蛋白3抗體

豬血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)甘露糖；D-甘露糖配子生成素抗體

豬胸腺激活調節(jié)趨化因子(TARC)D-甘露糖(標準品)γ谷氨酰轉肽酶2重鏈抗體

豬腫瘤壞死因子受體超家族成員1B(TNFRSF1B)N-辛酰-N-葡糖(MEGA-8)γ-谷氨酰轉肽酶5重鏈抗體

豬T特異性鳥苷三磷酸酶(Tgtp)N-癸酰-N-葡糖(MEGA-10)磷酸化GATA結合蛋白3抗體
牛呼腸孤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒Phospho-Rb (Thr821)  磷酸化視網膜母瘤相關蛋白1抗體單組份酸性樣品溶劑 水分≤0.01%

secretory IgA  分泌型免疫球蛋白A抗體庫侖法無隔膜卡爾費休試劑 用作電解液

RECK  金屬蛋白酶抑制因子RECK抗體庫侖法通用型陽用卡爾費休試劑 用作有隔膜式陽電解液

REG4/RELP  再生因蛋白4抗體庫侖法含吡啶陰用卡爾費休試劑 *按G8 7600-87配制

RELN/Reelin  絡絲蛋白抗體庫侖法酮測定陽用卡爾費休試 也可用作無隔膜電解液

Rbms3  抑癌因Rbms3抗體庫侖法安全型陽用卡爾費休試劑 不含、氯

RET/C ret  指狀蛋白RET抗體庫侖法安全型陰用卡爾費休試劑 不含、氯和四氯化碳

Phospho-Ret (Tyr905)  磷酸化指狀蛋白RET抗體庫侖法酮測定陰用卡爾費休試 用作有隔膜陰電解液