公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供最新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

商品介紹：

使用方法：
收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

培養(yǎng)操作：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

AR42J (大鼠胰腺外分泌細(xì)胞)    大鼠胰腺外分泌細(xì)胞：AR42J     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

ARPE-19 (人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞)     人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞：ARPE-19     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

AsPC-1 (人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞)     人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞：AsPC-1     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

AtT-20 (小鼠垂體瘤細(xì)胞)    小鼠垂體瘤細(xì)胞：AtT-20     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

B16 (小鼠黑色素瘤細(xì)胞)    小鼠黑色素瘤細(xì)胞：B16     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

Bcap-37 (人乳腺癌細(xì)胞)    人乳腺癌細(xì)胞：Bcap-37     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

BEL-7402 (人肝癌細(xì)胞)    人肝癌細(xì)胞：BEL-7402     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

BEL-7404 (人肝癌細(xì)胞)    人肝癌細(xì)胞：BEL-7404     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

BGC-823 (人胃腺癌細(xì)胞(低分化))    低分化：BGC-823     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

BHK-21 [C-13] (倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞)    倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞：BHK-21 [C-13]     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

BIU-87 (人膀胱癌細(xì)胞)     人膀胱癌細(xì)胞：BIU-87     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

BRL 3A (大鼠肝細(xì)胞)    大鼠肝細(xì)胞：BRL 3A     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

BNL CL.2 (小鼠胚胎肝細(xì)胞)    小鼠胚胎肝細(xì)胞：BNL CL.2     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

BRL (大鼠肝細(xì)胞)    大鼠肝細(xì)胞：BRL     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

BS-C-1 (非洲綠猴腎細(xì)胞)    非洲綠猴腎細(xì)胞：BS-C-1     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

BT-474 [BT474] (人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞)     人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞：BT-474 [BT474]     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

BT-549 (人乳腺管癌細(xì)胞)     人乳腺管癌細(xì)胞：BT-549     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

BxPC-3 (人原位胰腺腺癌細(xì)胞)     人原位胰腺腺癌細(xì)胞：BxPC-3     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

C127 [C-127] (小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞)    小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞：C127 [C-127]     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

C2C12 (小鼠成肌細(xì)胞)    小鼠成肌細(xì)胞：C2C12     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶    

血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體    

拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體    

α-1抗胰抗體    

α-1抗體    

ATP結(jié)合蛋白家族6抗體    

三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗體    

脂聯(lián)素受體2抗體    

ANGEL1蛋白抗體    

ANGEL2蛋白抗體    

ANKLE2蛋白抗體    

睪丸特異性錨樣蛋白1抗體    

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13B抗體    

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A1抗體    

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體    

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體    

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體    

氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP合成酶6G抗體    

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體    

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體    

丙型肝炎病毒核結(jié)合蛋白-1抗體    

人膀胱癌細(xì)胞：5637芳香基硫酸酯酶K抗體    

神經(jīng)元突觸前膜蛋白抗體    

錨定蛋白G抗體    

肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin抗體    

整合素樣金屬蛋白酶與型抗體