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產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 是 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
產(chǎn)品名稱:細(xì)胞線粒體分離試劑盒圖片
規(guī)格:50-100次
儲(chǔ)存條件:—20℃,12個(gè)月
用途:又稱培養(yǎng)細(xì)胞消化液,用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化。
注意事項(xiàng):無(wú)菌溶液,經(jīng)過(guò)濾除菌處理。主要由胰酶或胰蛋白酶、EDTA組成,含酚紅。自備材料:
1、 PBS、Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液
2、 顯微鏡
3、 離心機(jī)
注意事項(xiàng):
1、 盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù),以免失效。
2、在使用 Trypsin-EDTA solution 過(guò)程中,要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。
3、Trypsin-EDTA solution 消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差。
4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
操作步驟(僅供參考):
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
CHORDC1英文名稱:CEBP Delta人蘭尼堿受體2(RYR2)免疫試劑盒
capsid protein英文名稱:CEBPE人蘭尼堿抗體免疫試劑盒
Cathelicidin英文名稱:phospho-CEBPE (Thr74)人賴氨酰氧化酶免疫試劑盒
CCDC134英文名稱:CEECAM1人賴氨酸特異性脫甲基酶5A(JARID1A)免疫試劑盒
CCDC69英文名稱:C1QL4人醌NADH脫氫酶1(NQO1)免疫試劑盒
CCDC98英文名稱:C19orf2人跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員11(MS4A11)免疫試劑盒
CCDC70英文名稱:CCDC62人空泡毒素相關(guān)蛋白A(VacA)免疫試劑盒
CCDC51英文名稱:CCDC64人空腸彎曲菌(CJ)抗體(IgM)免疫試劑盒
細(xì)胞線粒體分離試劑盒圖片FABP12英文名稱:EFS大鼠組織因子與活化凝血因子7復(fù)合物免疫試劑盒
FJX1英文名稱:Eph receptor A5大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒
G gamma3英文名稱:EDG8大鼠組織因子(TF)前體 免疫試劑盒
G gamma7英文名稱:Ephexin-1大鼠組織因子(TF)免疫試劑盒
G protein alpha 13英文名稱:Phospho-eIF2 alpha(Ser51)大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA) 免疫試劑盒
G protein alpha 16英文名稱:ELOVL2大鼠組織多肽抗原(TPA)免疫試劑盒
G protein alpha inhibitor 1英文名稱:ELOVL5大鼠組織蛋白去乙?;?HD)免疫試劑盒
G Protein alpha x+z英文名稱:Emx1大鼠組織蛋白酶K(cath-K)免疫試劑盒
使用說(shuō)明:
1. 貼壁細(xì)胞的消化:
a.吸去培養(yǎng)液,用無(wú)菌的PBS、Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
b.加入少量胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅,不含EDTA),略蓋過(guò)細(xì)胞,室溫放置30秒至2分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
c.顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)。此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅,不含EDTA)。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
d.如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅,不含EDTA)重新消化。 如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000-2000g離心1分鐘,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅,不含EDTA)后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2. 組織的消化:
a.不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。 附錄:不同胰酶細(xì)胞消化液的比較和選擇
1. 如果希望消化能力比較強(qiáng),推薦選擇C0201胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶)和C0203 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅),這兩種胰酶細(xì)胞消化液都含有EDTA,消化能力相對(duì)更強(qiáng)一些。
2. 如果希望觀察比較方便,推薦選擇含酚紅的C0203 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅)和C0207 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅,不含EDTA)。
3. 對(duì)于酚紅可能會(huì)干擾后續(xù)的測(cè)試分析,推薦選擇不含酚紅的C0201 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶)和C0205 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶,不含EDTA)。
4. 對(duì)于EDTA可能會(huì)干擾后續(xù)的測(cè)試分析時(shí),推薦選擇不含EDTA的C0205 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶,不含EDTA)和C0207 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅,不含EDTA)。
5. 對(duì)于胰酶特別敏感的細(xì)胞,即對(duì)于消化時(shí)間特別快、消化時(shí)間比較難控制的情況,推薦選擇C0202胰酶細(xì)胞消化液(0.05%胰酶)或C0204 胰酶細(xì)胞消化液(0.05%胰酶, 含酚紅)。
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