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海藻糖合成酶(TS)可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6726 |
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商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50管/48樣 |
檢測(cè)方法 | 可見(jiàn)分光光度法 |
貨號(hào) | GOY-01S6726 |
商品介紹:
測(cè)定意義
哺乳動(dòng)物血液中的葡萄糖稱為血糖,是其體內(nèi)糖的主要運(yùn)輸形式。血糖濃度受神經(jīng)系統(tǒng)和激素的調(diào)節(jié)而保持相對(duì)穩(wěn)定,調(diào)節(jié)失衡時(shí)出現(xiàn)高血糖和低血糖。糖尿病、顱內(nèi)壓增加和脫水癥等均可引起高血糖;飯后,精神緊張也可出現(xiàn)生理性高血糖。相反,胰島β細(xì)胞增生或腫癌等,垂體、腎上腺皮質(zhì)和甲狀腺功能減退,以及嚴(yán)重肝病患者均可出現(xiàn)低血糖癥狀。此外,饑餓和劇烈運(yùn)動(dòng)可引起暫時(shí)的低血糖。
測(cè)定原理:
葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并產(chǎn)生過(guò)氧化氫;過(guò)氧化物酶催化過(guò)氧化氫氧化4-氨基林偶聯(lián)酚,生成有色化合物,在505nm有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板和蒸餾水。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液 BR2,6-二叔丁基對(duì)甲酚 CP,98%PCA-1/Yo(Human purkinje cell autoantibody) ELISA Kit 人抗浦肯野抗體/抗Yo抗體
LEB增菌液 BR對(duì)甲苯磺酸,—水 AR,99%Human anti-Sa-antibody ELISA Kit 人抗Sa抗體
李氏增菌液基礎(chǔ) BRDL- 99%ANNA-2/Ri(Human neuronal nuclear autoantibody) ELISA Kit 人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體
水解乳蛋白 BRDL- ≥99%, FCChnRNP/RA33(Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies/anti-RA33-antibody) ELISA Kit 人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體
麥芽浸膏 BR甘 AR,99.5-100.5%anti-Q-Ab(Human anti-Q fever antibody) ELISA Kit 人抗Q熱抗體
麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基 BR甘 分析標(biāo)準(zhǔn)品PM-Scl/PM-1(Human polymyositis-sclerosis antibody) ELISA Kit 人抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體
霉菌液體培養(yǎng)基 BR甘 藥典級(jí),Ph. Eur., BP, USP, 99-101%Human anti-PL7-antibody ELISA Kit 人PL7抗體/抗蘇氨酰tRNA合成
麥芽浸膏湯 BR甘 用于電泳, ≥99%PL12/AlaRS(Human anti-PL12-antibody) ELISA Kit 人PL12抗體/抗氨酰tRNA合成
血糖含量可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒反三碘甲狀腺原(rT3)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
小鼠芳香免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
豬E選擇素(E-Selectin/CD62E)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
流感A病毒(FluA)抗體(IgA)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
軟骨糖蛋白39(HC gp-39)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
二氫樣2(DPYSL2)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)免疫試劑盒*直銷
兔子神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
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