商品屬性：

商品介紹：

測定意義

CAD是木質(zhì)素生物合成途徑中的關(guān)鍵酶之一，是木質(zhì)素單體合成反應(yīng)中的最后一步，催化多種不同的肉桂醛（香豆醛、芥子醛以及松柏醛等）生成與之相應(yīng)的肉桂醇。該酶多存在于高等植物、酵母、菌類中，研究該酶可以探討多種生物細胞發(fā)育過程中木質(zhì)素沉積的代謝機理，為減少水果石細胞含量提高其品質(zhì)提供依據(jù)。

測定原理：

CAD催化肉桂醇和NADP生成肉桂醛和NADPH，在340nm下測定NADPH生成速率，即可反映CAD活性。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

實驗方法學(xué)：

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

組織相容性復(fù)合體α抗體Human SEC5/EXOC2 ELISA Kit相關(guān)抗體流式組化 XR0280R（抗大鼠）

肝生長因子激活抑制蛋白2抗體Human SEC61alpha ELISA Kitsrc原癌基因抗體流式組化

HOMER2抗體Human SDR42E1 ELISA KitL-天冬二甲酯鹽酸鹽

瘤病調(diào)控因子1抗體（鋅指蛋白395）Human SDCCAG8 ELISA KitBOC-L-天冬

人類狀瘤病18 E6單克隆抗體Human SCN4B ELISA Kit胰凝乳蛋白（牛）

異質(zhì)核糖核蛋白F抗體Human SDCCAG10 ELISA Kit卵白素（雞蛋）

異質(zhì)核糖核蛋白K抗體Human SCNM1 ELISA Kit透明質(zhì)酸鈉

異質(zhì)核糖核蛋白L抗體Human SCNN1A ELISA Kit鈉

肉桂醇脫氫酶（CAD)紫外分光光度法大鼠血管舒緩激肽(BK)免疫試劑盒*直銷

肝素輔因子II-凝血(HCII-T)復(fù)合物免疫試劑盒進口、組裝

巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫試劑盒進口、分裝

抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)免疫試劑盒*直銷

豬補體蛋白3(C3)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

馬銅鋅超氧化物歧化(Cu/Zn-SOD/SOD1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

大鼠CC趨化因子受體9(CCR9)免疫試劑盒進口、分裝

大鼠兒茶抑素免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

大鼠可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)免疫試劑盒進口、分裝

雞溶菌(LZM)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。