當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>輔酶Ⅱ系列>> 硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)微量法
貨號 | GOY-01S6369 |
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商品介紹
測定意義 TrxR是一種NADPH依賴的包含FAD結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶,屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員,與硫氧還蛋白以及NADPH共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng)。TrxR與GR活性類似,催化GSSG還原生成GSH,是氧化還原循環(huán)關(guān)鍵酶之一。 測定原理: TrxR催化NADPH還原DTNB生成TNB和NADP+,TNB在412 nm有特征吸收峰,通過測定412nm波長處TNB的增加速率,即可計(jì)算TrxR活性。 自備儀器和用品: 低溫離心機(jī)、可調(diào)節(jié)移液器、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6369 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
胍碳酸氫鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品甘草酸 93%Anti-A2AR 腺苷A2A受體抗體
順式-烏頭酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%氫加蘭他敏 98%Anti-AACT-Alpha1 α-1抗胰糜蛋白抗體
N-(4-氨酰)-L-谷 97%二氫黃酮甙 97%Anti-AAK1 AP2關(guān)聯(lián)激1抗體
花生四烯酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC)和厚樸酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-AARS2 氨酰tRNA合成2抗體
腺苷-5'- from yeast, ≥97%和厚樸酚 ≥98% (HPLC)Anti-AAT α-1抗胰蛋白抗體
對苯胂酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品酚 97%Anti-AATK AATK凋亡關(guān)聯(lián)激抗體
4-聯(lián)苯 AR番茄紅素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥95%Anti-AATF 拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體
4-聯(lián)苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品柚皮苷 95%Anti-ABCA1 腺苷三結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體
硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)微量法1,2:3,5-雙-O-異亞-alpha-D-呋喃木糖 98%大鼠肝臟型脂肪結(jié)合蛋白(L-FABP)免疫試劑盒透明質(zhì)合成3抗體Hemopexin/HPX 糖蛋白β-1B抗體
雙酮-D-甘露糖 97%大鼠肝生長因子受體(c-MET/HGFR)免疫試劑盒熱休克蛋白56抗體Hemoglobin α 糖化血紅蛋白α抗體
(R)-2,5-二氫-3,6-二氧-2-異吡 97%大鼠肝生長因子激活物(HGFA)免疫試劑盒熱休克蛋白70相互作用蛋白抗體Hemoglobin Beta 血紅蛋白β抗體
(S)-2,5-二氫-3,6-二氧-2-異吡 97%大鼠肝生長因子(HGF)免疫試劑盒熱休克蛋白相關(guān)蛋白4抗體Heme Oxygenase 1/HO-1 血紅素氧合 1/熱休克蛋白32抗體
2'-脫氧胸苷-5'-三三鈉,二水 96%大鼠肝素結(jié)合EGF樣生長因子(HBEGF)免疫試劑盒透明質(zhì)合成2抗體hemagglutinin protein/H 麻疹病血凝素抗體
N-癸酰-N-葡糖 高純級大鼠肝X受體β(LXRβ)免疫試劑盒同源盒因HOXA3蛋白抗體HEF1 蛋白激底物相關(guān)蛋白抗體
D-(+)-塔羅糖 99%大鼠肝X受體α(LXRα)免疫試劑盒同源盒因HOXA4蛋白抗體HECA HECA蛋白抗體
D-塔格糖 99%大鼠甘油三酯(TG)免疫試劑盒同源盒因HOXA6蛋白抗體HEC1 癌高表達(dá)蛋白Hec1抗體
D-山梨糖 98%大鼠甘油-3-脫氫(GAPDH)免疫試劑盒同源盒因HOXA7蛋白抗體HEBP2 Heme結(jié)合蛋白2抗體
D-半糖 97%大鼠甘露糖寡糖1,2-α-甘露糖苷IA(MAN1A1)免疫試劑盒羥類固(17β)脫氫4/17β-HSD4抗體HEBP1/p22HBP 血紅素結(jié)合蛋白1抗體
1-甘露糖野尻霉素鹽鹽 98%大鼠甘膽(CG)免疫試劑盒血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體HEATR7B2 熱休克蛋白受體家族蛋白7B2抗體
2-脫氧-L-核糖 99%大鼠甘肽/甘素(GAL)免疫試劑盒血紅素結(jié)合蛋白1抗體HEATR6 癌增強(qiáng)蛋白抗體
1-乙-(3-二氨)碳二亞鹽鹽 98.5% 大鼠甘氨免疫試劑盒血紅蛋白α抗體HEATR3 HEATR3蛋白抗體
D(+)巖藻糖 99%大鼠干因子受體(SCFR)免疫試劑盒結(jié)合球蛋白β抗體HEATR2/HEAT repeat containing protein 2 HEATR2蛋白抗體
L-巖藻糖 99%大鼠干因子/肥大生長因子(SCF/MGF)免疫試劑盒海馬豐富因轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體Heamachrome 血紅素抗體
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