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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>輔酶Ⅱ系列>> 抗壞血酸氧化酶(AAO)微量法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6393 |
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商品介紹
測(cè)定意義 AAO是定位于植物細(xì)胞壁的糖蛋白,屬“藍(lán)銅氧化酶"家族。細(xì)胞壁內(nèi)的抗壞血酸和AAO與細(xì)胞壁的代謝和生長(zhǎng)有著密切的聯(lián)系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通過質(zhì)膜上的b還原,該過程中電子的跨膜運(yùn)輸能夠促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。 測(cè)定原理: AAO可直接氧化AsA,通過測(cè)定AsA的氧化量,可計(jì)算得AAO活力。 實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備: 低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液器、研缽、冰、蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6393 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
2,4-二甲氧基苯酸 96%溴乙酸甲酯 97%Anti-CD79A/IGBP-1 /FITC 熒光素標(biāo)記球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體IgG
4-(二甲基氨甲?;?苯酸 97%3-甲氧基-1- 98%Anti-B7-1/CD80 /FITC 熒光素標(biāo)記抗激分子B7-1蛋白抗體IgG
4-(二甲基)苯酸 95%庚二酸 99%Anti-CD80/B7-1/FITC 熒光素標(biāo)記激分子B7-1蛋白抗體IgG
N,N-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊烷-2-基)苯 982-溴代異丁酸叔丁酯 98%Anti-CD82/KAI1/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1抗體IgG
4-(二苯基基)苯酸 98%2,4-二氨苯 CPAnti-CD83/Cell surface protein HB15/FITC 熒光素標(biāo)記CD83抗體IgG
2,4-二酸 97%2,4-二氨苯 98%Anti-CD84/SLAMF5/FITC 熒光素標(biāo)記CD84抗體IgG
3,4-二酸 98%2,3-二甲 98%Anti-SLAMF6/LY108/FITC 熒光素標(biāo)記SLAMF6抗體IgG
3,5-二甲氧基苯酸 98%2,3-二甲 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-CD86/B7-2 /FITC 熒光素標(biāo)記CD86抗體IgG
抗壞血酸氧化酶(AAO)微量法檢測(cè)試劑盒 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.9%豬心型脂肪結(jié)合蛋白(FABP3/FABP11/MDGI)免疫試劑盒化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體xCT/CCBR1 鈣離子通道阻端耐藥蛋白CCBR1抗體
電子級(jí)豬心鈉肽(ANP)免疫試劑盒酰輔A脫氫長(zhǎng)鏈抗體XBP-1 核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白抗體
ACS 光譜級(jí), ≥99.9%豬心肌特異性肌鈣蛋白T(c)免疫試劑盒分裂周期蛋白5抗體XAGE2 腫瘤/抗原12家族2抗體
LC-MS,≥99.9%豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒β淀粉樣肽/Aβ42抗體XAF1/FBXO39 XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗體
色譜級(jí)+, ≥99.9%豬酰輔A去飽和(SCD)免疫試劑盒ADCK4蛋白抗體XAB2/SYF1 XAB2蛋白抗體
無酮,用于Romanowsky染色法豬纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)免疫試劑盒抑癌蛋白AIMP3抗體X protein/HB-X (N-Terminus) 抗乙肝病X蛋白抗體(N端)
蛋白測(cè)序級(jí),≥99.9%豬纖溶原激活物抑制因子(PAI)免疫試劑盒相關(guān)蛋白AKAP抗體X protein/HB-X (middle) 抗乙肝病X蛋白抗體
梯度色譜級(jí), ≥99.9%豬色素C氧化(COX)免疫試劑盒蛋白激A錨定蛋白6抗體WWP1 WW結(jié)構(gòu)域E3泛素連接1抗體
HPLC, ≥99.5%,用于制備豬色素c還原(CCR)免疫試劑盒肺α/β水解蛋白1抗體WWOX 包含氧化還原的WW域抗體
N-氨乙哌 99%豬間粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫試劑盒水解結(jié)構(gòu)域蛋白13抗體WT-1/Wilms Tumor Protein 腎母瘤蛋白抗體
二甘 98%豬間粘附分子2(ICAM-2)免疫試劑盒水解結(jié)構(gòu)域蛋白14B抗體WSTF 轉(zhuǎn)錄因子WSTF抗體
二乙烯三 Standard for GC,>99%(GC)豬戊糖素(PE)免疫試劑盒水解結(jié)構(gòu)域蛋白15抗體WSB2/WD SOCS box protein 2 信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白WD重復(fù)蛋白2抗體
二乙烯三 CP,97%豬瘟抗體免疫試劑盒肺α/β水解蛋白3抗體WRCH-1 WRCH1抗體
二乙烯三 97%豬瘟抗體(IgM)免疫試劑盒三腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白F亞3抗體WNT9A 信號(hào)通路Wnt9a抗體
二乙烯三 二乙烯三 99%豬瘟抗體(IgG)免疫試劑盒三腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白A亞5抗體Wnt8b WNT蛋白家族Wnt8b抗體
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