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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>其它系列>> 抗壞血酸氧化酶(AAO)紫外分光光度法
貨號(hào) | GOY-01S6394 |
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選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50管/48樣 |
檢測(cè)方法 | 紫外分光光度法 |
貨號(hào) | GOY-01S6394 |
商品介紹:
測(cè)定意義
AAO是定位于植物細(xì)胞壁的糖蛋白,屬“藍(lán)銅氧化酶"家族。細(xì)胞壁內(nèi)的抗壞血酸和AAO與細(xì)胞壁的代謝和生長(zhǎng)有著密切的聯(lián)系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通過(guò)質(zhì)膜上的b還原,該過(guò)程中電子的跨膜運(yùn)輸能夠促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。
測(cè)定原理:
AAO可直接氧化AsA,通過(guò)測(cè)定AsA的氧化量,可計(jì)算得AAO活力。
實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備:
低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液器、研缽、冰、蒸餾水。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
Bacillus sp.FK506結(jié)合蛋白8檢測(cè)試劑盒
Bacillus sp.Ring1和YY1結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑盒
Bacillus sp.外核苷三二水解2檢測(cè)試劑盒
Bacillus sp.LIM半胱豐富域蛋白1檢測(cè)試劑盒
Bacillus sp.;激26檢測(cè)試劑盒
Bacillus sp.甘露糖結(jié)合凝集素2檢測(cè)試劑盒
Bacillus sp.ARMC6檢測(cè)試劑盒
Bacillus sp.分裂周期因子42檢測(cè)試劑盒
抗壞血酸氧化酶(AAO)紫外分光光度法對(duì)二二聚體 99%IL-16(Human Interleukin 16) ELISA KIT 人白介素16兔前列腺特異性抗原(PSA/KLK3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
丁二 99%IL-13(Human Interleukin 13) ELISA KIT 人白介素13兔胰脂肪(PL)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
6-三氟煙 97%IL-12/P70(Human Interleukin 12) ELISA KIT 人白介素12兔B淋巴瘤因子10(Bcl-10)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
環(huán)己二氧硅烷 97%IL-11(Human Interleukin 11) ELISA KIT 人白介素11兔β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
二二氧硅烷 98%IL-10(Human Interleukin 10) ELISA KIT 人白介素10兔回腸脂肪結(jié)合蛋白6(FABP6)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
二二茂鈦 97%IGFBP-4(Human insulin-like growth factors binding protein 4) ELISA Kit 人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4兔過(guò)氧化物體增殖物激活受體δ( PPAR-δ)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
4-氨-3-磺 98%IGFBP-3(Human insulin-like growth factors binding protein 3) ELISA Kit 人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3兔神經(jīng)特異性烯化(NSE)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
3-環(huán)己酮 97%IGFBP2(Human insulin-like growth factors binding protein 2) ELISA Kit 人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2兔凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激I(ASK-1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
DL-N-乙酰高半胱氨硫內(nèi)脂 99%IGFBP-1(Human insulin-like growth factors binding protein 1) ELISA Kit 人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1兔蕈堿型乙酰受體亞型M1(M-AChRM1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
DL-半胱氨 97%IGF-2(Human insulin-like growth factors 2) ELISA Kit 人胰島素樣生長(zhǎng)因子2兔粘蛋白2(MUC2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
DL-高胱氨 98%IGF-1(Human insulin-like growth factors 1) ELISA Kit 人胰島素樣生長(zhǎng)因子1兔著絲粒蛋白F(CENPF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
DL-高半胱氨硫內(nèi)脂鹽鹽 98%IFN- Gamma(Human Interferon Gamma) ELISA Kit 人γ干擾素兔短蛋白聚糖(BCAN)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
N-甘氨 97%ICAM-1/CD54(Human intercellular adhesion molecule 1) ELISA Kit 人間粘附分子1兔叉頭框蛋白O3(FOXO3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
四氮唑乙 98%HGF(Human hepatocyte growth factor) ELISA kit 人肝生長(zhǎng)因子兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β激蛋白22(TSC22)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
氮化鈦 99.5%,2-10 μmGM-CSF(Human Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor) ELISA Kit 人粒巨噬集落激因子兔核因子κB受體激活因子(RANκ)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
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