實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    結(jié)直腸腺癌細胞：NCI-H716(H716)

別稱NCI H716; H716; H-716; NCIH716

種屬人類

年齡（性別）男性，33歲

組織來源器官：盲腸；疾病：結(jié)直腸腺癌

生長特性半貼半懸

細胞形態(tài)上皮細胞樣

背景描述NCI-H716 [H716]細胞是從一位經(jīng)5-氟治療的患者腹水中得到的細胞建立的細胞株。NCI-H716 [H716]細胞與其它結(jié)直腸癌細胞系不同，它有多巴脫羧酶，細胞質(zhì)中有核心致密的內(nèi)分泌型顆粒。NCI-H716 [H716]細胞不表達TAG-72或CA19-9抗原，也不生成癌胚抗原(CEA)。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時間~50小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 Cripto / TDGF1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

狗 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

狗 IL1R2 / IL1RB 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

狗 NRG1-alpha (ECD) 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

狗 NRG1-alpha (EGF Domain) 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

狗 IL18R1 人細胞裂解液 (陽性對照) (

結(jié)直腸腺癌細胞：NCI-H716(H716)金胺O染色液  5ml*6

100g 馬來酸 Maleic Acid 室溫密封保存

100mL PEG 3350 Solution,50%   PEG 3350 Solution,50%   常溫保存

50次 柱式真菌DNAout Column Fungal DNAOUT 常溫

2 ug pGL3-IFNβ-lucifer pGL3-IFNβ-lucifer 低溫運輸，-20℃保存

25mL Bovine Serum Albumin Solution（BSA溶液），20mg/mL Bovine Serum Albumin Solution，20mg/mL 常溫保存

IL-22BP/IL22RA2  白介素22受體結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser118)  磷酸化雌激素受體α抗體 規(guī)格: 0.1mlACE1/CD143  管緊張素轉(zhuǎn)換ACE1抗體 0.1ml

Phospho-NFKB p65(Ser276)  磷酸化細胞核因子NF-κB p65抗體 規(guī)格: 0.1ml

HEBP1/p22HBP  紅素結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

MURF3  肌肉特定環(huán)指蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

SHOC2/Sur8  富含重復蛋白SHOC2抗體 規(guī)格: 0.2ml