當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>科研細胞>>細胞系>> 腺病毒E型LAMP試劑盒
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱:腺病毒E型LAMP試劑盒
英文名稱:Adenovirus e lamp Kit
貨號:GOY-L63655
產品規(guī)格:50次
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。好設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
猿猴病毒40大腫瘤抗原氨基段肽段基異酸酯
生長抑制素-28酐
物質P(1-7)鄰溴芐
物質P(1-9)氟-2-(三氟甲基)甲
物質P(7-11)2-甲基-甲氧基
TA-0910,他替瑞林甲氧基肼鹽酸鹽
促甲狀腺激素釋放激素,游離酸溴吡啶鹽酸鹽
尿皮質激素Ⅲ,小鼠(R)-(+)-叔丁基亞磺酰
纈絡肽(VQY),豬偶氮二甲酸二酯
血管活性腸肽6-硝基吲哚啉
Z-Ala-Ala-Leu-pNA2-甲基-5-甲酸
三亞甲基碳酸酯2-氟-
(氨基基)嗎啉-酮2-氨基-吡啶
碳酸錳(>98%,BR)2-氨基-6-溴吡啶
酸二氫錳(>98%,BR)4,6-二羥基-2-甲巰基嘧啶
馬來酰亞基甲酸-N-羥基琥珀酰亞酯(>97%,BC)芐氧基酰
2-巰基并噻唑(>98%,BC)2-甲基氮雜環(huán)丁烷
松三糖單水;D-(+)-松三糖一水2,二茴香
腺病毒E型LAMP試劑盒BADH2(水稻)GDF8/MSTN/FITC 熒光素標記羊抗生長分化因子8/肌肉抑制素IgG100 ul
丁酰膽酯酶單克隆GDF-9/FITC 熒光素標記抗生長、分化因子9IgG100 ul
酸化β 連環(huán)素蛋白GDNF/FITC 熒光素標記膠質細胞源性神經營養(yǎng)因子IgG100 ul
β-球蛋白GDNF Receptor alpha 2/FITC 熒光素標記膠質細胞系源性神經營養(yǎng)因子受體alphaIgG100 ul
β-球蛋白phospho-Arhgef2 (Ser810)/FITC 熒光素標記抗、大、Rho鳥苷酸交換因子2IgG100 ul
緩激肽B2受體Gelsolin/FITC 熒光素標記凝溶膠蛋白IgG100µl
丁酰膽酯酶(N端)Gentamicin/FITC 熒光素標記IgG100 ul
丁酰膽酯酶(C端)GFAP/FITC 熒光素標記膠質纖維酸性蛋白IgG20 ul
BLAMEGFP/FITC 熒光素標記綠色熒光蛋白IgG100 ul
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業(yè)負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。