當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>海藻糖系列>> 48T/96T海藻糖含量可見分光光度法檢測試劑盒
國產(chǎn)貨號 | GOY-01S6716 |
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選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50管/48樣 |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
貨號 | GOY-01S6716 |
商品介紹:
測定意義
海藻糖廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中。由于海藻糖具有*的不同于其他碳水化合物的生物學特性,能在干旱、高溫、脫水、冷凍、高滲透壓及毒性物質(zhì)等惡劣環(huán)境下保護生物體細胞蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、核酸等組分不受損害。
測定原理:
蒽酮比色法。具有靈敏度高﹑簡便快捷﹑適用于微量樣品的測定等優(yōu)點。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板﹑研缽、濃硫酸(不允許快遞)和蒸餾水。
實驗方法學:
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
N,N,N',N'-四甲基-O-(3,4-二氫-4-氧代-1,2,3-苯并三-3-基)脲四烯效唑 分析標準品97.5%Mose Anti-rat IgM/Gold 金標記小鼠抗大鼠IgM(10nm/15nm)
L-別 99%乙烯菌核利 分析標準品,99%Rabbit Anti-Avidin/Gold 金標記兔抗親和素 (10nm/15nm)
Fmoc-Tyr(3,5-I2)-OH 98%乙烯菌核利標準溶液100μg/ml,u=2%,溶劑:酮Rabbit Anti-human IgG/Gold 金標記兔抗人IgG(10nm/15nm)
N-Fmoc-D-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸 98%乙烯菌核利標準溶液10μg/ml,u=2%,溶劑:酮Rabbit Anti-human IgM/Gold 金標記兔抗人IgM (10nm/15nm)
N-Boc-L-叔亮 99%滅草猛 分析標準品,97%Rabbit Anti-human IgA/Gold 金標記兔抗人IgA(10nm/15nm)
(2R,3S)-(1-氨?;?2-羥基基)芐酯 99%滅草猛 分析標準品
Rabbit Anti-bovine IgG/Gold 金標記兔抗牛IgG(10或15nm)
0.3~0.8mmol/g, 100~200 mesh 1% DVB二甲基硅油DC-200 GC,粘度~350 mPa.s, neat(25 °C)Rabbit Anti-Bovine IgM/Gold 金標記兔抗牛IgM (10或15nm)
0.3~0.8mmol/g, 100~200 mesh 1% DVB二甲基硅油DC-200 粘度~10 mPa.s, neat(25 °C)Rabbit Anti-Bovine TG/Gold 金標記兔抗牛甲狀腺球蛋白 (10或15nm)
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