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小鼠血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)ELISA試劑盒洗滌方法:
1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。
1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。
小鼠半乳糖凝集素-9(mouse Galectin-9)
小鼠胃泌素(mouse Gastrin)
小鼠Ghrelin(mouse Ghrelin)
小鼠胰高血糖素樣肽-1(mouse GLP-1)
小鼠胰高血糖素(mouse Glucagon)
小鼠GRO(mouse GRO)
小鼠神經(jīng)膠質(zhì)細胞衍化營養(yǎng)因子(mouse GDNF)
小鼠生長因子(mouse GH)
小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子3(mouse GATA3)
小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子4(mouse GATA4)
小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(mouse HIF-1α)
小鼠熱休克蛋白60(mouse Hsp-60)
小鼠組胺(mouse HIS)
小鼠肝生素(mouse HGF)
小鼠糖化血紅蛋白(mouse HbA1c)
小鼠組胺(mouse Histamine)
小鼠熱休克蛋白70(mouse HSP70)
小鼠羥脯氨酸(mouse HYP)
小鼠高遷移率族蛋白(mouse HMGB1)
小鼠可溶性細胞間粘附分子-1 (mouse sICAM-1)
小鼠干擾素-a(mouse IFN-a)
小鼠干擾素-b(mouse IFN-b)
小鼠干擾素-r(mouse IFN-r)
小鼠類胰島素生長因子-1(mouse IGF-1)
小鼠類胰島素生長因子-2(mouse IGF-2)
小鼠類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-1(mouse IGFBP-1)
小鼠類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-2(mouse IGBPF-2)
小鼠類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-3(mouse IGBPF-3)
小鼠IgA(mouse IgA)
小鼠IgE(mouse IgE)
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