當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>PCR相關(guān)試劑>>恒溫?cái)U(kuò)增系列>> Bst 4.0 Basic Mix (液體預(yù)混)
HotStart Bst4.2 大規(guī)格(125ml包裝酶)
產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 加工定制 | 否 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品分類 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
Bst 4.0 Basic Mix (液體預(yù)混) | 恒溫?cái)U(kuò)增系列 | 100Tx20μl | BJ-PJ6565 |
該制品為單一組分的 MasterMix(2 倍濃度),包含了反應(yīng)緩沖液、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶等,使用時(shí)只需要加入引物、模板即可進(jìn)行核酸恒溫?cái)U(kuò)增。Bst4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依賴于 RNA 模板的聚合酶活性(逆轉(zhuǎn)錄),還具有依賴于 DNA 的聚合酶活性,因此無論DNA 或 RNA 樣本均可使用該制品進(jìn)行高效的恒溫?cái)U(kuò)增。該制品是進(jìn)行 LAMP 及 RT-LAMP 擴(kuò)增反應(yīng)的試劑。優(yōu)化的反應(yīng)體系,確??焖俚耐瓿蓹z測試劑的反應(yīng)體系建立。該系列產(chǎn)品不包含任何其它輔助染料,在 LAMP 的擴(kuò)增搭配 OG 橙綠變色管進(jìn)行可視化變色反應(yīng)。除此外,該制品還可以用于其它恒溫?cái)U(kuò)增實(shí)驗(yàn),包括 CPA、SMAP 等。
儲(chǔ)存:長期保存制品于-20℃,保存 2 年。
使用實(shí)例(以 LAMP OG 橙綠變色為例)橙綠變色染料(OG Dye)以凍干的形式預(yù)加在 8 聯(lián)管蓋上。在 LAMP 反應(yīng)完畢后(在反應(yīng)完畢前,務(wù)
必不能將管蓋上染料混入反應(yīng)液中),將 0.2ml EP 管顛倒溶解 OG 染料后。LAMP 的反應(yīng)產(chǎn)物將與 OG 染料形成強(qiáng)烈的綠色肉眼可見變色反應(yīng)(陽性),而未發(fā)生擴(kuò)增的 EP管為深橙色(陰性)。
(1)配制反應(yīng)體系
在 0.2ml EP 反應(yīng)管中加入下述試劑
2xBst 4.0 Basic Mix 10 μl
*10xLAMP Primer Mix 2 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到總體積 20 μl
*10xLAMP Primer Mix 濃度:FIP/BIP 分別為 16 μM、LoopF/B 分別為 4 μM、F3/B3 分別為 2 μM全部試劑加入完畢后,輕彈 EP 管底部后,再蓋上 OG 橙綠變色管(蓋上管蓋后務(wù)必不能再劇烈混合與倒置,以防止將管蓋上的 OG 染料溶解,OG 染料一旦混入反應(yīng)液中將會(huì)終止 LAMP 反應(yīng))。
實(shí)驗(yàn) LAMP Primer Mix 分別采用 1、1.5、2 μl,以陰性不變色,陽性樣品正常變色為標(biāo)準(zhǔn),作為后續(xù)測試用量。
(2)反應(yīng)體系配好后,置于 60~68°C(實(shí)驗(yàn)采用65°C)進(jìn)行反應(yīng) 20~45min。(擴(kuò)增良好的引物組合,通常 25min 即可變色,一般不超過 45min,實(shí)驗(yàn)設(shè)置20、25、30、45min)。
(3)觀察結(jié)果:觀察結(jié)果時(shí),盡可能不要與配制反應(yīng)空間共用,以防止污染操作臺(tái)。將反應(yīng) EP 管倒置,并手腕輕甩,反應(yīng)液浸泡 EP 管蓋上的 OG 染料,靜置 30s。再將 EP 反應(yīng)管正置,并輕甩反應(yīng)液到 EP 管底部,此時(shí)擴(kuò)增樣品將變?yōu)轷r艷肉眼可見綠色,而陰性未發(fā)生擴(kuò)增的管將為深橙色。
注意事項(xiàng)
1. 在用于其它恒溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)時(shí)(如 CPA、SMAP 等),可參考如上策略進(jìn)行使用,反應(yīng)時(shí)間可能會(huì)需要調(diào)整。
2. 關(guān)于礦物油的使用,在配制完 LAMP 反應(yīng)體系后,可加入一滴礦物油覆蓋于反應(yīng)液上部,以減少氣溶膠的污染。
3. 鑒于特殊的生產(chǎn)工藝, 全系恒溫?cái)U(kuò)增 Mix 系
列均不能進(jìn)行濁度分析。
下列是公司正在出售的產(chǎn)品:
鋅指蛋白180抗體 英文名;ZNF180 | 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-2抗體 英文名;Smad2 |
δ樣蛋白4抗體 英文名;DLL4 | Ten-eleven轉(zhuǎn)運(yùn)基因1蛋白抗體 英文名;TET1 |
COL10A1重組兔單克隆抗體 | 辣根過氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗Human IgE單克隆抗體 |
磷酸化蛋白激酶C zeta 抗體 英文名;phospho-PKC zeta (Thr560) | APC標(biāo)記人IL-17A單克隆抗體 |
Coilin蛋白抗體 英文名;Coilin | 跨膜蛋白176A抗體 英文名;TMEM176A |
微管蛋白γ/Tubulin γ抗體 英文名;gamma tubulin | APC標(biāo)記人IFN-γ單克隆抗體 英文名;human IFN-γ/APC |
RAS癌基因家族蛋白RAB40A抗體 英文名;RAB40A | 死亡受體3抗體 英文名;DR3 |
堿性磷酸酶(腸型)抗體 | PE-Cy5標(biāo)記人CD55單克隆抗體 英文名;human CD55/PE-Cy5 |
9號(hào)染色體開放閱讀框40抗體 | 肌動(dòng)蛋白輔助蛋白類樣蛋白抗體 |
鉀離子通道蛋白家族成員3抗體 英文名;KCNE3 | 19號(hào)染色體開放閱讀框7抗體 |
9號(hào)染色體開放閱讀框3抗體 英文名;C9orf3 | 環(huán)指蛋白56抗體 英文名;RNF56 |
細(xì)胞周期依賴性激酶抑制相關(guān)蛋白抗體 | 19號(hào)染色體開放閱讀框77抗體 英文名;C19orf77 |
鋅指蛋白340抗體 | Bst 4.0 Basic Mix (液體預(yù)混)磷酸化紅細(xì)胞膜條帶4.1蛋白抗體 |
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