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儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
規(guī)格參數(shù):
資源名稱 梭形芽孢桿菌說明書
種屬: Bacillus│fusiformis
分離基物: 輕馬勃
提供形式: 斜面培養(yǎng)物
安全等級: 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 食品安全
培養(yǎng)基: 33
生長條件: 37℃
存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
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培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
產(chǎn)品僅用于科研生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對穩(wěn)定的細(xì)菌群體,產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。
小鼠肝枯否細(xì)胞*培養(yǎng)基凝結(jié)芽胞桿菌拉丁屬名: Bacillus coagulans
小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞*培養(yǎng)基金產(chǎn)色鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces aureochromogenes
NCI-H205細(xì)胞培養(yǎng)基蟲草屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
小鼠前列腺干細(xì)胞*培養(yǎng)基*銀耳、白木耳拉丁屬名: Tremella fuciformis Berk.
NCI-H209 [H209]細(xì)胞培養(yǎng)基羽扇豆根瘤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
小鼠心臟干細(xì)胞*培養(yǎng)基香菇拉丁屬名: Lentinula edodes
小鼠滋養(yǎng)層干細(xì)胞*培養(yǎng)基阿爾及利亞擬盤多毛孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
NCI-H2170細(xì)胞培養(yǎng)基孟氏假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
小鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞*培養(yǎng)基新月彎孢霉拉丁屬名: Cochliobolus lunatus
小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基矮棒曲霉拉丁屬名: Aspergillus clavatonanicus
小鼠腸道干細(xì)胞*培養(yǎng)基栗疫菌拉丁屬名: Cryphonectria parasitica
NCI-H157細(xì)胞培養(yǎng)基丁香鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces lilacinus
小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基大腸埃希氏菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
NCI-H1688細(xì)胞培養(yǎng)基腸沙門氏菌腸炎亞種拉丁屬名: Salmonella enterica subsp. enterica
小鼠外周血中性粒細(xì)胞*培養(yǎng)基脫葉鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces exfoliates
小鼠精原干細(xì)胞*培養(yǎng)基運(yùn)動發(fā)酵單胞菌拉丁屬名: Zymomonas mobilis
DME培養(yǎng)基*高糖,含丙酮酸鈉和谷氨酰胺DMEM
*高糖,含L-谷氨酰胺,粉末
*高糖,含L-谷氨酰胺,液體
*低糖,粉末
*低糖,液體
M9肉湯*BRM9 Broth
M9CA肉湯*BRM9CA Broth
梭形芽孢桿菌說明書SERAFREECRYOPRESERVATIONMEDIA無血清細(xì)胞凍存培養(yǎng)基(RPMI)組織培養(yǎng)級6 x 5 mlCOLD
71-55-61.1.1-三錄乙烷1,1,1-Trichloroethane
季戊二醇,英文名或英文縮寫:NPG,級別:BR,98%,規(guī)格:5毫升
錄化-2-氧基-4-嗎啉重氮本正離子錄化鋅 2-Mqthoxy-4-morpholinobqnzqnqdiczonium chloridq zinc chloridq doublq sclt 67801-08-2
抗菌素,英文名或英文縮寫:Zeocin,級別:USP級,900-1050mcg/mg,規(guī)格:5克
VANTAGEREVIEWSTRIPPINGBUFFER優(yōu)勢型剝離試劑超純級透明無色液體COLDsigma
1731-84-6壬酸甲酯metxyl nonanoate;Pelargonic acid metxyl ester
2-Chloro-5-(ethoxycarbonyl)pxenylboronic acid 913835-93-5
丁二酸單甲酯 mono-Methyl hydrogen succinate,95% 3878-55-5 25G 通用試劑
石膽酸/3-羥基膽基酸/石膽甾酸/膽石酸/Lithocholic acid BR,97% 10克 國產(chǎn)/進(jìn)口
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