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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>維生素系列>> 維生素B1測試盒可見分光光度法
貨號(hào) | BJ-01611382-2 |
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商品介紹:
測定意義 維生素B1(Vitamin B1)是構(gòu)成脫羧fu酶的主要成分,參與細(xì)胞代謝中的三羧酸循環(huán),是維持機(jī)體正常代謝必須的水溶性維生su,在生物體能量代謝中有重要的作用。 測定原理 VB1在堿性條件下還原鐵氰hua鉀生成亞鐵氰hua鉀,亞鐵氰hua鉀與Fe3+在弱酸條件下生成普魯士藍(lán),在704nm有特征吸收峰。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、研缽、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、1 mL玻璃比色皿、蒸餾水。 |
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
維生素B1測試盒可見分光光度法 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-01611382-2 |
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
胰島抗原12/核轉(zhuǎn)錄因子SOX13抗體*松乳菇
有絲分裂相關(guān)蛋白INSC抗體烏飯樹擬莖點(diǎn)霉銀杏suan C15:1
磷suan化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體豇豆慢生根瘤菌乙酰哈巴苷
RAN結(jié)合蛋白7抗體阪崎腸桿菌射干
兔抗人γ-鏈淡黃曲霉金銀花
免疫球蛋白超家族成員B抗體黑曲霉麥芽
六磷suan肌激酶3抗體裂孔平伏菌大葉骨碎樸
干擾sukappa蛋白抗體菊苣假單胞菌牡丹皮
白介su1α/IL-1α抗體釀酒酵母鹽suan丙卡特羅
白介su1α/IL-1α抗體芽孢桿菌
磷suan化白介su2受體β鏈抗體枯草芽孢桿菌甲磺suan多沙唑嗪
胰島su樣蛋白3抗體釀酒酵母葡萄糖suan鈉
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白a1抗體華根霉
重組人白介su18抗體黃傘(可訂購)雙氯芬suan鉀
α胰蛋白mei重鏈H4抗體畢赤酵母黑su瘤相關(guān)蛋白抗體流式免疫組化
維生素B1測試盒可見分光光度法肽酰脯氨酰異構(gòu)酶/親環(huán)su樣蛋白1(PPIL1)試劑盒Anti-CLDN1 Antibody纖維母生長因子4抗原
磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(PLTP)試劑盒Anti-CLDN10 Antibody纖維母生長因子5抗原
7(KLK7)試劑盒 Anti-CLDN19 Antibody衰老關(guān)鍵蛋白抗原
碳suan酐酶VI(CA6)試劑盒Anti-CLDN2 AntibodyFosB抗原
線粒體解偶聯(lián)蛋白2(UCP-2)試劑盒Anti-CLDN19 AntibodyFOS樣抗原2
血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒 Anti-CLDN3 Antibody叉頭蛋白F1抗原
髓鞘性蛋白(MBP)試劑盒Anti-CLDN5 Antibody插頭蛋白J1抗原
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