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規(guī)格參數:
資源名稱 大球蓋菇規(guī)格
種屬: Stropharia│rugoso-annulata
提供形式: 凍干物
安全等級: 1
模式菌株: no
應用領域: 食用
培養(yǎng)基: CM0835
生長條件: 25~26℃
存儲條件: 礦物油法;定期移植法
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儀器設備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,產品僅用于科研將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多種細菌混合組成的相對穩(wěn)定的細菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產氣腸細菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關系接近的一類細菌群體,與同屬內其他種有著明顯差異;當涉及到細菌保存時,菌種是指細菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內的細菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨立分離的單細胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。
人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細胞*培養(yǎng)基枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
人胎盤絨毛膜細胞*培養(yǎng)基申氏不動桿菌*拉丁屬名: Acinetobacter schindleri
人脈絡膜血管細胞*培養(yǎng)基單色下皮黑孔菌拉丁屬名: Cerrena unicolor
兔上皮細胞*培養(yǎng)基海欖雌小單孢菌拉丁屬名: Micromonospora avicenniae
兔視網膜色素上皮細胞*培養(yǎng)基致密曲霉拉丁屬名: Aspergillus delicatus
兔子宮內膜上皮細胞*培養(yǎng)基植物乳桿菌拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
兔肺微血管內皮細胞*培養(yǎng)基云南紅球菌拉丁屬名: Rhodococcus yunnanensis
兔晶狀體上皮細胞*培養(yǎng)基動球菌拉丁屬名: Kineococcus sp.
大鼠肌源性干細胞*培養(yǎng)基新城疫病毒拉丁屬名: Newcastle disease virus
大鼠真皮微血管內皮細胞*培養(yǎng)基嗜鹽堿球菌拉丁屬名: Natronococcus sp.
兔角膜內皮細胞*培養(yǎng)基紫萁小菇拉丁屬名: Mycena purpureofusca
兔氣管上皮細胞*培養(yǎng)基彎孢菌用途: 研究
大鼠滋養(yǎng)層干細胞*培養(yǎng)基Curvularia cocis Matsush. 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
兔主動脈內皮細胞*培養(yǎng)基謝瓦曲霉拉丁屬名: Aspergillus chevalieri
大鼠心臟干細胞*培養(yǎng)基*蜜環(huán)菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
大鼠前列腺干細胞*培養(yǎng)基波茨坦芽孢桿菌拉丁屬名: Brevibacillus borsensis
LB肉湯*用于分子生物學實驗中大腸桿菌的保存和培養(yǎng)LB Broth
LB瓊脂*大腸桿菌增殖LB Agar
LB-Top Agar*大腸桿菌增殖LB-Top Agar
LB營養(yǎng)瓊脂*用于發(fā)酵工程、基因工程和分子生物學中大腸桿菌的培養(yǎng)LB Nutrient Agar
LB Lennox肉湯*大腸桿菌增殖LB Lennox Broth
LB Lennox瓊脂*BRLB Lennox Agar
匹克氏肉湯基礎A*溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)Pick,s Broth Base A
大球蓋菇規(guī)格S-Carboxymetxyl-L-Cysteine羧甲司坦100微克BR,99%
1977-9-8酚酞pxenolphthalein
溶劑橙861,4-Dixy7noxyanthrainoneone1,4-二羥基-9,10-二酮25克實習級,90%
十二烷基磺酸鈉 Sodium laurylsulfonate,≥99% 2386-53-0 250G 通用試劑
二甲基二乙氧基硅烷 Diethoxydimethylsilane,97% 78-62-6 100ML 通用試劑
鎳箔10克RT
5534-9-8丙酸倍錄米松Beclometxasone Dipropionate
3-Thiopxeneethanamine, α-(trifluorometxyl)- 1017781-57-5
丁位十四內酯 δ-Tetradecalactone,≥98% 2721-22-4 25G 通用試劑
1-(青基)錄化 N-(CYcNOMqTHYL)PYRIDINIUM CHLORIDq 1781-29-3
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數,而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復雜,對平板的要求比較高,產品僅用于科研可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。
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