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弗雷德里克斯堡假單胞菌說(shuō)明書

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更新時(shí)間:2020-12-03 10:15:11瀏覽次數(shù):178次

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弗雷德里克斯堡假單胞菌說(shuō)明書低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。

基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來(lái)長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。

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規(guī)格參數(shù):
資源名稱  弗雷德里克斯堡假單胞菌說(shuō)明書
種屬: Pseudomonas│frederiksbergensis

分離基物: 土壤

提供形式: 凍干物

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 848

生長(zhǎng)條件: 20℃

存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無(wú)菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無(wú)菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長(zhǎng)條件 30℃,好氧
存儲(chǔ)條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,產(chǎn)品僅用于科研從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
人癌血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基谷氨酸棒桿菌Ⅲ型拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

人牙齦上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基中慢生華癸根瘤菌用途: 與沙打旺共生固氮

人肝外膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基庫(kù)爾勒海洋桿菌拉丁屬名: Pontibacter korlensis

人骨髓樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)*培養(yǎng)基香菇用途: 食用、藥用

人角膜內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基木糖葡糖酸醋桿菌拉丁屬名: Gluconacetobacter xylinus

人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基植物乳桿菌拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum

人角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

人腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基黃曲霉拉丁屬名: Aspergillus  flavus

人晶狀體上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基羅伊氏乳桿菌拉丁屬名: Lactobacillus  reuteri

人腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基銅綠假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas  aeruginosa

人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

人骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞*培養(yǎng)基白姬松茸注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

人真皮淋巴上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基橙鱗傘注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基蟋蟀草平臍蠕孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基細(xì)極鏈格孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
假單胞F瓊脂*銅綠(綠膿)假單胞菌色素生成試驗(yàn)Pseudomonas Agar F

衛(wèi)矛醇半固體瓊脂*細(xì)菌衛(wèi)矛醇發(fā)酵試驗(yàn)Dulcitol Semisolid Agar

四號(hào)瓊脂*霍亂弧菌選擇性分離培養(yǎng)NO.4 Agar Base

我妻氏血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)*用于副溶血性弧菌的溶血試驗(yàn)Wagstsuma Agar Base

60%/L化鈉蛋白胨肉湯*副溶血性弧菌的前增菌培養(yǎng)L Nac1 Peptone Water

42℃生長(zhǎng)培養(yǎng)基*副溶血弧菌42℃生長(zhǎng)試驗(yàn)42℃ Growth Medium

水解酪蛋白瓊脂*用于鑒別蠟樣芽孢桿菌分解酪蛋白試驗(yàn)Casein Agar Medium
弗雷德里克斯堡假單胞菌說(shuō)明書SDS,20%(W/V)SOLUTIONSDS溶液蛋白組學(xué)級(jí)200MLRT

9005-70-3吐溫85;吐混85;聚氧山梨糖醇酐三油酸酯;聚乙氧基三油酸清涼茶醇;聚氧失水山梨醇三油酸酯Tween 85;POE(20) sorbitan trioleate;Polysorbate

PBS-TWEENPH7.5PBS溶液,含0.05% 吐溫20超純級(jí)1LRT

乙酸鈷,四水 Cobalt(II) acetate tetrahydrate 6147-53-1 10G 通用試劑

1-溴基-1-丙烯 1-Bromo-1-propene,98% 590-14-7 5ML 通用試劑

GLUTATHIONE,REDUCED谷胱甘肽(還原型)高純級(jí)白色至米白色結(jié)晶粉末COLDsigma

71010-52-1冷結(jié)樹酯GELLAN GUM

4-bromo-3-(chlorosulfonyl)- 2-Thiopxenecarboxylic acid etxyl est 1231420-61-3

丁酸丙酯 Propyl butyrate,99% 105-66-8 100ML 通用試劑

Trifluorothymidine曲扶胸甙1克高純,98%

 

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