當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>糖酵解系列>> 果糖1,6二磷酸(FDP)測試盒可見分光光度法
貨號 | BJ-01611167-2 |
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商品介紹:
測定意義 果糖1,6-二磷酸是機體內(nèi)的高能代謝物和代謝調(diào)控劑,是糖酵解途徑的重要中間體,廣泛存在于動植物和微生物體內(nèi),能影響細胞內(nèi)鉀離子的濃度,改善葡萄糖和其他能量底物的代謝,促進組織氧的釋放,廣泛應用于臨床醫(yī)藥制劑。 測定原理 醛縮酶催化果糖1,6-二磷酸降解,產(chǎn)物與DNPH縮合成紫紅色物質(zhì),在540nm有特征吸收峰。 自備實驗用品及儀器 天平、低溫離心機、研缽、恒溫水浴鍋、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿。 |
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
果糖1,6二磷酸(FDP)測試盒可見分光光度法 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-01611167-2 |
測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A。
注意事項:
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復凍融會導致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當分裝,以避免反復凍融導致的檢測效果下降。
標準品稀釋時所用的稀釋液應盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標準品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標準品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
piwi 樣1蛋白(抗原)墳墓節(jié)桿菌大鼠DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3A(DNMT3A)elisa定量檢測試劑盒
過氧化酶活化增生受體γ(抗原)根瘤菌大鼠免疫球蛋白G2c(IgG2c)elisa定量檢測試劑盒
蛋白磷酸酶4(抗原)枯草芽孢桿菌大鼠5脂氧合酶激活蛋白(FLAP)elisa定量檢測試劑盒
一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因(抗原)蘇云金芽胞桿菌大鼠血管粘附蛋白1(VAP-1)elisa定量檢測試劑盒
RRAD(多肽抗原)枯草芽孢桿菌大鼠甘露糖受體C1(MRC1)elisa定量檢測試劑盒
基質(zhì)衍生因子-1(抗原)豚雙歧桿菌大鼠α1抗胰蛋白mei(α1-AT)elisa定量檢測試劑盒
shank1多肽抗原窄脊正青霉大鼠免疫球蛋白G2a(IgG2a)elisa定量檢測試劑盒
溶質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白家族22成員17(多肽抗原)乳桿菌屬大鼠異檸檬酸脫氫酶 (ICD) elisa定量檢測試劑盒
可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白SLC24A5(抗原)金針菇(毛柄金錢菌、冬菇)大鼠色su上皮衍生因子(PEDF)elisa定量檢測試劑盒
溶質(zhì)攜帶物家族-1(抗原)根瘤菌大鼠表皮調(diào)節(jié)su(EREG)elisa定量檢測試劑盒
依賴鈉鈣交換蛋白6(抗原)米曲霉大鼠磷酸烯式丙酮酸羧激酶1(PCK1)elisa定量檢測試劑盒
凋亡抑制因子的一種(抗原)少根根霉大鼠抗環(huán)胍an酸肽抗體(ACCPA)elisa定量檢測試劑盒
核糖核蛋白抗原RO/SSA(抗原)意大利青霉大鼠甲狀腺球蛋白(TG)elisa定量檢測試劑盒
干燥癥SSB/La蛋白串珠鐮孢大鼠血管緊張suII(ANG II)elisa定量檢測試劑盒
Smad 2(抗原)德爾布有孢圓酵母大鼠成纖維生長因子19(FGF19)elisa定量檢測試劑盒
果糖1,6二磷酸(FDP)測試盒可見分光光度法瘦su(LEP)試劑盒Anti-MUC13 Antibody斑聯(lián)蛋白
晶體蛋白(CLC)試劑盒 Anti-MUC20 Antibody鋅指蛋白474
趨化因子CC受體樣蛋白1(CCRL1)試劑盒Anti-MUC2 Antibody鋅指蛋白BED4
信號su4C (SEMA4C)試劑盒 Anti-MUC3A Antibody著絲粒蛋白
軸蛋白抑制蛋白2(AXIN2)試劑盒Anti-MUC4 Antibody鋅指蛋白231
G蛋白偶聯(lián)受體37(GPR37)試劑盒Anti-MUC5AC Antibody(PB0318)鋅指蛋白354C
顆粒酶A(GzmA)試劑盒 Anti-MUC5AC Antibody鋅指蛋白312
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