您好, 歡迎來(lái)到儀表網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氧化磷酸化系列>> 轉(zhuǎn)氫酶1測(cè)試盒微量法
Ca++Mg++ ——ATP酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法
Na+k+ ——ATP酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào) | BJ-01611136-1 |
---|
商品介紹:
測(cè)定意義:TH位于線粒體的內(nèi)膜上,又稱為呼吸電子傳遞鏈復(fù)合體六,催化NADH+NADP+和 NAD++NADPH相互轉(zhuǎn)化。催化正向反應(yīng)稱為TH-1。線粒體NADH含量增加時(shí)會(huì)導(dǎo)致線粒體膜的H+電化學(xué)梯度升高,因而促進(jìn)了電子傳遞鏈上ROS的產(chǎn)生。TH-1促進(jìn)NADH轉(zhuǎn)換為NADPH,從而提高線粒體的抗氧化能力。測(cè)定原理:NADH和NADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的轉(zhuǎn)氫反應(yīng)不能導(dǎo)致340nm吸光度發(fā)生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸磷酸(APADP+)替代NADP+,TH-1催化 APADP+還原生成的APADPH在375nm有特征光吸收,因此通過(guò)測(cè)定375nm光吸收增加速率,來(lái)計(jì)算TH-1活性。需自備的儀器和用品:可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
轉(zhuǎn)氫酶1測(cè)試盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | BJ-01611136-1 |
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無(wú)需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色,如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
肉棕櫚酰基轉(zhuǎn)移酶1A多肽抗原異配囊接霉猴固類生成因子1(SF1)elisa定量檢測(cè)試劑盒
二氫嘧啶酶樣2CRMP2抗原嗜果刀孢豬脯an酸/精an酸豐富端亮an酸豐富重復(fù)蛋白(PRELP)elisa定量檢測(cè)試劑盒
降鈣su受體樣蛋白抗原扣囊復(fù)膜孢酵母豬基質(zhì)金屬蛋白mei抑制因子2(TIMP-2)elisa定量檢測(cè)試劑盒
cRaf/Raf1抗原巨大芽孢桿菌豬纖調(diào)蛋白(FMOD)elisa定量檢測(cè)試劑盒
MEK1/MAPKK1抗體(N-端)黃褐牛肝菌猴鐵蛋白(FE)elisa定量檢測(cè)試劑盒
促腎上腺皮質(zhì)激su釋放因子銅綠假單胞菌豬D-乳酸脫氫酶(D-LDH)elisa定量檢測(cè)試劑盒
衰老抑制基因抗原狹旋毛殼豬中期因子(MK)elisa定量檢測(cè)試劑盒
環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲(chóng))抗原樟疫霉豬神經(jīng)降壓su(NT)elisa定量檢測(cè)試劑盒
降鈣su抗原環(huán)形凸臍蠕孢猴補(bǔ)體因子I(CFI)elisa定量檢測(cè)試劑盒
C端結(jié)合蛋白1抗原人纖維單胞菌猴粒巨噬集落激因子(GMCSF/CSF2)elisa定量檢測(cè)試劑盒
淋巴相關(guān)抗原4/性T抗原-4產(chǎn)氣莢膜梭菌 suC型豬二氫酸轉(zhuǎn)乙酰酶(DLAT)elisa定量檢測(cè)試劑盒
心肌肌鈣蛋白釀酒酵母豬細(xì)絲蛋白A(FLNα)elisa定量檢測(cè)試劑盒
間隙連接蛋白32抗原鹽反硝化枝芽孢桿菌 猴Smad同源物7 (Smad7/MADH7)elisa定量檢測(cè)試劑盒
間隙連接蛋白36抗原大腸桿菌猴β葡萄糖醛酸酶(GUSβ)elisa定量檢測(cè)試劑盒
間隙連接蛋白40(多肽)雷丸*豬不對(duì)稱二甲基精an酸(ADMA)elisa定量檢測(cè)試劑盒
轉(zhuǎn)氫酶1測(cè)試盒微量法血管生成su(ANG)試劑盒Anti-LBR Antibody去泛su化酶3
低密度脂蛋白(LDL)試劑盒Anti-LBP Antibody突觸囊泡融合蛋白Unc18-3
球蛋白G Fc段低親和力受體IIIa(FcγR3A)試劑盒 Anti-LCAT Antibody泛su蛋白連接酶E3α2
非紅血影蛋白β4 (SPTβN4)試劑盒Anti-LCAT Antibody腫瘤抑制基因UVRAG
環(huán)腺苷二磷酸核糖水解酶(cADPRH/CD38)試劑盒Anti-LBP Antibody泛su結(jié)合酶UFC1
補(bǔ)體C5轉(zhuǎn)化酶(C5c)試劑盒 Anti-LCAT Antibody泛su結(jié)合酶E2J1
促甲狀腺su釋放(TRH)試劑盒Anti-LCN1 Antibodyfu酶色suC還原酶核心蛋白1
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。