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規(guī)格參數(shù):
資源名稱 堅強芽孢桿菌說明書
種屬: Bacillus│firmus
分離基物: 沉積物
提供形式: 凍干物
安全等級: 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 分類學(xué)及海洋微生物研
培養(yǎng)基: 0223
生長條件: 30℃
存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
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儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,產(chǎn)品僅用于科研將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多種細菌混合組成的相對穩(wěn)定的細菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當涉及到細菌保存時,菌種是指細菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內(nèi)的細菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨立分離的單細胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。
Bovine Lumpy Skin Disease Virus(LSDV)牛結(jié)節(jié)疹病毒LAMP試劑盒英文名稱:MTT Cell Proliferation Assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格:500T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒以MTT(高純度)作為指示劑,在經(jīng)典操作步驟的基礎(chǔ)上,采用*的甲臜溶解液配方,可以直接溶解甲臜沉淀,無需去除原有的培養(yǎng)液。從而避免因去除培養(yǎng)液時甲臜被部分去除而引起的操作誤差。具有本底低,靈敏度高,線性范圍寬,操作簡單等特點。,本試劑盒還提供配套的一次性針頭過濾器和注射器,為實驗帶來更多的便利。
噻唑蘭(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT),也稱作溴化噻唑藍四氮唑,是一種黃色染料,已經(jīng)普遍替代傳統(tǒng)的臺盼藍染色法或者放射性同位素插入法,用來檢測細胞的活力,細胞增殖以及細胞毒性分析。檢測原理在于:MTT是一種可接受氫離子的化合物染料,帶正電荷,具有細胞膜滲透性?;罴毎€粒體中的琥珀酸脫氫酶能夠?qū)⑼庠催M入的MTT還原成為水不溶性的深藍色MTT-甲臜結(jié)晶,而死細胞不具有此功能。甲臜結(jié)晶是不能穿透細胞膜,因此沉積在處于增殖且未受損傷的細胞內(nèi)。甲臜結(jié)晶可用DMSO或者酸化的異丙醇溶解出來,酶標儀下測定570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量與活細胞數(shù)目成正比,用以評估細胞存活狀況。
產(chǎn)品組份:
MTT粉末——————25mg
MTT溶劑——————5ml
甲臜溶解液————50ml
除菌套裝—————1包
注意事項
1)甲臜溶解液具有腐蝕性和毒性,使用時注意防護。
2)MTT有致癌性,應(yīng)小心操作;MTT溶液需要無菌,因其對菌很敏感。MTT溶液不可4℃保存超過1周,因其可能發(fā)生降解,導(dǎo)致檢測結(jié)果錯誤。
3)MTT法只能用來檢測細胞相對數(shù)和相對活力,但不能測定細胞數(shù)。在用酶標儀檢測結(jié)果的時候,為了保證實驗結(jié)果的線性,MTT吸光度好在0-0.7范圍內(nèi)。
4)使用微孔板進行檢測,如果細胞培養(yǎng)時間比較長,需要注意蒸發(fā)的問題。一般情況,由于96孔板周圍一圈容易蒸發(fā),建議棄用周圍一圈的方法,改加PBS,水或者細胞培養(yǎng)液等。也可通過將96孔板放在靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的位置,以減緩蒸發(fā)現(xiàn)象。
5)甲臜溶解液低溫或者常溫保存可能會產(chǎn)生沉淀,只需37℃水浴使其充分溶解,混勻后即可使用。
6)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
儲存條件:4℃,有效期1年
丙酮磷溶液標準物質(zhì) 1mL Alternaria spp.交鏈孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
丙酮中吡菌磷溶液標準物質(zhì) 1mL Amapari virus(AMAV)阿馬帕里病毒RT-PCR試劑盒
丙酮中二溴磷溶液標準物質(zhì) 1mL Amapari virus(AMAV)阿馬帕里病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
丙磷溶液標準物質(zhì) 1mL Amapari virus(AMAV)阿馬帕里病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
丙酮中滅菌磷溶液標準物質(zhì) 1mL Amidostomum anseri鵝裂口線蟲PCR試劑盒
丙酮中毒壤磷溶液標準物質(zhì) 1mL Amidostomum anseri鵝裂口線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒
丙酮中谷硫磷溶液標準物質(zhì) 1mL Amidostomum anseri鵝裂口線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
丙酮中乙基谷硫磷溶液標準物質(zhì) 1mL Amycolaptosis spp.擬無枝菌酸菌通用PCR試劑盒
丙酮中乙基溴硫磷溶液標準物質(zhì) 1mL Amycolaptosis spp.擬無枝菌酸菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒
丙酮中溴硫磷溶液標準物質(zhì) 1mL Amycolaptosis spp.擬無枝菌酸菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
丙酮中溶液標準物質(zhì) 1mL Amycolata autotrophica自養(yǎng)無枝酸菌PCR試劑盒
丙酮中苯硫磷溶液標準物質(zhì) 1mL Amycolata autotrophica自養(yǎng)無枝酸菌染料法熒光定量PCR試劑盒
溶液標準物質(zhì) 1mL Amycolata autotrophica自養(yǎng)無枝酸菌探針法熒光定量PCR試劑盒
土壤QC樣-多環(huán)芳烴(PAH) 30克 Anaplasma centrale 中央無漿體(無形體)PCR試劑盒
總余氯標準物質(zhì) 20mL Anaplasma centrale 中央無漿體(無形體)染料法熒光定量PCR試劑盒
堅強芽孢桿菌說明書大鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒英文名稱:Rat L-Selectin ELISA Kit 進口/分裝
大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒英文名稱:Rat N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP ELISA Kit進口/原裝
大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒英文名稱:Rat N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG ELISA Kit *
大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒英文名稱:Rat N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit *
人過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)ELISA試劑盒英文名稱:human peroxisome proliferative activated receptor gama coactivator 1 alpha,PPARGC1 ELISA Kit*
人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒英文名稱:Human peroxisome proliferators activator receptors alpha,PPAR-α ELISA Kit進口/分裝
人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA試劑盒英文名稱:Human Peroxisome Proliferator-activated receptor γ,PPAR-γ ELISA Kit進口/原裝
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,產(chǎn)品僅用于科研可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。
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