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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒微量法

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-08-15 17:12:49瀏覽次數(shù):130次

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貨號(hào) BJ-0161115-1
輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:肝病核心抗原C區(qū)抗體ZNF268(1a)/FITC 熒光su標(biāo)記鋅指脂蛋白-1a抗體IgG
型肝炎病-NS1抗體ZNF268(1b)/FITC 熒光su標(biāo)記鋅指脂蛋白-1b抗體IgG
471-66-9標(biāo)準(zhǔn)品細(xì)菌可溶性膜制備試劑盒
兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;CCC-SMC-1品牌真菌/酵母細(xì)胞可溶性總制備試劑盒
紅色熒光標(biāo)記人結(jié)直腸癌細(xì)胞;HCT

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱(chēng)

檢測(cè)方法

規(guī)格

貨號(hào)

輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒微量法

微量法

100管/48樣

BJ-0161115-1

商品介紹:

測(cè)定意義:

fu酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,NADP+和NADPH含量測(cè)定可以計(jì)算NADP(NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值,其變化與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應(yīng)密切相關(guān)。NADPH/NADP+比值不僅是細(xì)胞氧化還原態(tài)的主要標(biāo)志之一,而且在PPP途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調(diào)控作用。

測(cè)定原理:

分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP+和NADPH。NADPH通過(guò)PMS的遞氫作用,使氧化型噻唑藍(lán)(MTT)還原為甲瓚,570nm下檢測(cè)吸光值,從而測(cè)定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP+為NADPH,從而檢測(cè)NADP+含量。

所需的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

優(yōu)點(diǎn)如下:

1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn): X =103.3%。

7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。

8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。

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測(cè)定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。

2、 試劑三的稀釋?zhuān)簩⒃噭┤谜麴s水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。

注意事項(xiàng):

待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。

一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋?zhuān)划?dāng)樣品為血液等無(wú)需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色,如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體球孢白僵菌人神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)*培養(yǎng)基

磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體黃色籃狀菌小鼠腸粘膜上皮*培養(yǎng)基

脫氫膽固還原酶14抗體交角耳大鼠脈絡(luò)膜血管*培養(yǎng)基

甲狀腺su結(jié)合球蛋白抗體木耳大鼠關(guān)節(jié)軟骨*培養(yǎng)基

轉(zhuǎn)導(dǎo)suβ1X連鎖蛋白抗體葉點(diǎn)霉菌大鼠前脂肪*培養(yǎng)基

內(nèi)皮suB受體抗體玫煙色棒束孢大鼠小腸粘膜上皮*培養(yǎng)基

轉(zhuǎn)導(dǎo)suβ1X連鎖受體蛋白1抗體枯草芽孢桿菌小鼠骨髓基質(zhì)*培養(yǎng)基

甲狀腺受體相關(guān)蛋白220抗體樟疫霉大鼠視網(wǎng)膜muller

磷酸化甲狀腺受體相關(guān)蛋白220抗體平菇大鼠胰腺上皮*培養(yǎng)基

抑癌基因5抗體熒光假單胞菌大鼠胰島*培養(yǎng)基

腦腫瘤抑癌蛋白1抗體鹽水海桿狀菌大鼠支氣管上皮*培養(yǎng)基

肺癌抑癌蛋白1抗體毛殼菌小鼠胰腺星狀*培養(yǎng)基

前列腺癌抑癌蛋白3抗體豬丹絲菌大鼠神經(jīng)元*培養(yǎng)基

甲狀腺激su受體α1抗體禽分枝桿菌大鼠甲狀腺上皮*培養(yǎng)基

甲狀腺激su受體α1+α2抗體彎曲乳桿菌(更名類(lèi)干酪乳桿菌)大鼠氣管平滑肌*培養(yǎng)基
輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒微量法球蛋白A (IgA)試劑盒Anti-CSTB(Cystatin B) Antibodyras癌基因家族Rab9蛋白

STAT蛋白抑制因子3(PIAS3)試劑盒 Anti-CSTB(Cystatin B) Antibodyras癌基因家族RAB20

促紅生成su(EPO)試劑盒Anti-CSTB AntibodyRas樣蛋白A+B

脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)試劑盒 Anti-CTAG1A AntibodyRad51

甲狀腺su受體α(THRα)試劑盒 Anti-CTBP1 AntibodyRNA結(jié)合蛋白片段Y染色體家族蛋白2

CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白β(C/EBPβ)試劑盒Anti-CTBP1 Antibody(PB0400)RNA結(jié)合蛋白片段Y染色體家族蛋白1

5脂加氧酶(5-LO)試劑盒 Anti-CTBP2 Antibody(PB0401)RNA聚合酶III   

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后


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