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NAD蘋(píng)果酸酶(NADME)測(cè)試盒微量法
NAD蘋(píng)果酸酶(NADME)測(cè)試盒紫外分光光度法
NADP蘋(píng)果酸酶(NADPME)測(cè)試盒紫外分光光度法
NADP蘋(píng)果酸酶(NADPME)測(cè)試盒微量法
貨號(hào) | BJ-0161125-1 |
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優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
蔗糖磷酸化酶(SP)測(cè)試盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | BJ-0161125-1 |
商品介紹:
測(cè)定意義: SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中,裂解葡萄糖苷鍵,催化葡萄糖基轉(zhuǎn)移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等,合成相應(yīng)的葡萄糖基低聚糖。此外,SP還能催化合成熊果苷,具有的美白效果,在化妝品工業(yè)中具有重要應(yīng)用。 測(cè)定原理: SP能夠以磷酸為受體,催化蔗糖產(chǎn)生1-磷酸葡萄糖,在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為6-磷酸葡萄糖,在6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原NADP+生成NADPH,導(dǎo)致340nm光吸收值增加。測(cè)定340nm吸光度增加速率,即可計(jì)算SP活性。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器: 天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。 |
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無(wú)需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色,如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
泛su相關(guān)蛋白1抗體(鼻咽癌相關(guān)基因20蛋白)皺孢鏈霉菌人羊膜上皮
廣泛表達(dá)轉(zhuǎn)錄蛋白UXT抗體普通變形桿菌人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)
泛suD抗體哈茨木霉MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元
珠蛋白抗體紫紅曲霉MLF, 小鼠淋巴成纖維
尿卟啉原脫羧酶抗體環(huán)帶擬盤(pán)多毛孢RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元
磷酸化信號(hào)淋巴活化分子CD150抗體桔青霉RLF, 大鼠淋巴成纖維
泛su激活酶2B抗體嗜松青霉mCF, 小鼠心臟成纖維
ATP-依賴的RNA解旋酶p47抗體薄花邊傘2-1Trequinsin(PDE III 抑制劑 )2mg
等上游激因子1抗體擴(kuò)展青霉Vinblastine( 長(zhǎng)春新 )100μL規(guī)格
泛su化組蛋白H2AX抗體鐮刀菌U0126(MEK1/2 抑制劑 )1mg
TH糖蛋白抗體串珠鐮刀菌*Trichostatin A(HDAC 抑制劑 )100μg規(guī)格
紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白1抗體芽孢桿菌Tocopherol( 抗氧化劑 )2g
轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白3抗體釀酒酵母Superoxide dismutase( 抗氧化酶 )2mg規(guī)格
轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白1抗體淡黃濕傘星形膠質(zhì)生長(zhǎng)因子5mL規(guī)格
病抑制蛋白Viperin抗體球孢枝孢支氣道上皮生長(zhǎng)因子5mL
蔗糖磷酸化酶(SP)測(cè)試盒微量法補(bǔ)體成分5(C5)試劑盒Anti-CYP2B6 AntibodyRH血型C糖蛋白
TATA框結(jié)合蛋白/TBP相關(guān)因子(TAF)試劑盒Anti-CYP2E1 Antibody磷酸化雷帕霉su靶蛋白復(fù)合體2
巨噬清道夫受體1 (MSR1)試劑盒Anti-CYP2E1 Antibody環(huán)指蛋白138
轉(zhuǎn)錄因子20(TCF20)試劑盒Anti-CYP2E1 Antibody(PB0186)Nogo66受體相關(guān)蛋白3
褪黑su(MT)試劑盒Anti-CYP2S1 AntibodyRas相關(guān)區(qū)域家族1A
趨化su樣因子超家族成員4(CKLFSF4)試劑盒Anti-CYP2U1 AntibodyRh血型C抗原
蛋白激酶抑制劑α(PKIα )試劑盒Anti-CYP3A4 Antibody(PB1111)RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白6
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