當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>輔酶Ⅱ系列>> 脂肪酸合成酶(FAS)測試盒微量法
貨號 | BJ-0161124-1 |
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商品介紹:
測定意義: FAS是脂肪酸合成關(guān)鍵酶,催化乙酰fu酶A和丙二酰fu酶A而生成長鏈脂肪酸。FAS普遍表達(dá)于各種組織細(xì)胞中,在哺乳動(dòng)物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達(dá)豐富。 測定原理: FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH生成長鏈脂肪酸和NADP+;NADPH在340nm有吸收峰,而NADP+沒有;通過測定340nm 光吸收下降速率,計(jì)算FAS活性。 自備儀器和用品: 研缽、冰、臺式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。 |
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
脂肪酸合成酶(FAS)測試盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | BJ-0161124-1 |
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Use1抗體根瘤菌SGC-7901, 人胃腺癌系
上游結(jié)合蛋白1抗體蘇云金芽孢桿菌肯尼亞亞種U266B1 U266, 人多發(fā)性骨髓瘤
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白UNC93B抗體Paecilomyces formosus人輸尿管上皮*培養(yǎng)基
神經(jīng)突起誘導(dǎo)因子受體UNC5B抗體福氏志賀氏菌人胎盤滋養(yǎng)層*培養(yǎng)基
神經(jīng)突起生長誘導(dǎo)因子受體UNC5B抗體金頂側(cè)耳B16-F10, 小鼠黑色su瘤高轉(zhuǎn)移
神經(jīng)突起生長誘導(dǎo)因子受體UNC5D抗體總狀共頭霉人腎管狀上皮*培養(yǎng)基
神經(jīng)突起生長誘導(dǎo)因子受體Unc5a抗體層出鐮刀菌A549/DDP, 人肺腺癌耐藥株
二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶2抗體平菇COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維
尿酸酶大腸埃希菌RL95-2, 人內(nèi)膜腺癌系
尿苷二磷酸葡萄糖脫氫酶抗體瓊氏不動(dòng)桿菌WM35, 人黑色su瘤
荊豆凝集su1抗體植物乳桿菌人卵巢微血管內(nèi)皮*培養(yǎng)基
尿路上皮特異蛋白3抗體科氏葡萄球菌人肝星形*培養(yǎng)基
尿路上皮特異蛋白1a抗體靈芝U-2 OS, 人骨肉瘤
去泛su酶16抗體哈茨木霉BxPC-3, 人原位胰腺腺癌株
整合su結(jié)合性信號分子抗體葡萄座腔菌DU 145, 人前列腺癌
脂肪酸合成酶(FAS)測試盒微量法促腎上皮質(zhì)釋放(CRH)試劑盒 Anti-CYGB Antibody染色體濃縮調(diào)節(jié)蛋白2
凋亡相關(guān)因子配體(FASL/TNFSF6)試劑盒 Anti-CYLD AntibodyRho GTP酶激活蛋白GAP
基質(zhì)金屬蛋白mei原13 (Pro-MMP-13)試劑盒Anti-CYGB Antibody視黃結(jié)合蛋白
胰島su樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)試劑盒Anti-CYP11A1 Antibody補(bǔ)體應(yīng)答基因32
Bκ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(Nfkbie)試劑盒 Anti-CYP11A1 Antibody性蛋白1樣蛋白
蛋白二硫化物異構(gòu)酶A5(PDIA5)試劑盒Anti-CYP11B1 AntibodyE3泛su蛋白連接酶144A
髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)試劑盒 Anti-CYP11B1/C11B2/CYP11B2 Antibody轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子RFX4
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