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沙門(mén)氏菌第Ⅱ亞屬保存

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-11-22 18:44:11瀏覽次數(shù):157次

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沙門(mén)氏菌第Ⅱ亞屬保存低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。

儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
規(guī)格參數(shù):
資源名稱  沙門(mén)氏菌第Ⅱ亞屬保存
種屬: Salmonella│II

提供形式: 其他

安全等級(jí): 2

模式菌株: no

培養(yǎng)基: CM0051

生長(zhǎng)條件: 37℃

存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法

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培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無(wú)菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無(wú)菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
產(chǎn)品僅用于科研生長(zhǎng)條件 30℃,好氧
存儲(chǔ)條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過(guò)分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過(guò)程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過(guò)渡類(lèi)型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類(lèi),通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類(lèi)單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類(lèi)細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來(lái)長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
大麗花輪枝孢(棉花黃萎病菌)模式菌株安全等級(jí)1種屬Verticillium│dahliae

瓜模式菌株安全等級(jí)1種屬Colletotrichum│orbiculare

瓜枝孢(黃瓜黑星病菌)模式菌株安全等級(jí)1種屬Cladosporium│cucumerinum

玉蜀黍赤霉(麥類(lèi)赤霉病菌)模式菌株安全等級(jí)1種屬Gibberella│zeae

第九矛束霉模式菌株安全等級(jí)1種屬Doratomyces│nanus

煙色擬盤(pán)多毛孢模式菌株安全等級(jí)1種屬Pestalotiopsis│adusta

南瓜細(xì)基格孢模式菌株安全等級(jí)1種屬Ulocladium│cucurbitae

魔芋尾孢模式菌株安全等級(jí)1種屬Cercospora│amorphophalli

人淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體1elisa檢測(cè)試劑盒

英文名稱:Human LYVE-1 ELISA KIT

反應(yīng)性:Human

樣品類(lèi)型:Serum, plasma, Cell culture supernatant

靈敏度:15 pg/ml

檢測(cè)目標(biāo):LYVE-1

應(yīng)用:Sandwich ELISA
大鼠甲狀腺上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

SHG-44 (人膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

吳茱萸堿規(guī)格:20mg/支;98%

人肝細(xì)胞英文名稱:Hep G2

敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞英文名稱:BHK

麥康凱瓊脂/麥康克瓊脂/MacC用于分離腸道細(xì)菌250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

3T3-L1(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

PALCAM添加劑/PALCAM Supplement添加到HB4188中,用于李氏菌的選擇性分離培養(yǎng)10毫升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

磷酸鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基/磷酸鹽葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基/Phosphate Glucose Peptone Water用于甲基紅試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

伊紅美蘭瓊脂平板/EMB Agar Plate10塊國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

COLO 201(人結(jié)直腸腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Anglne(人卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠白血病細(xì)胞G-CSF依賴性英文名稱:NFS-60

煙型膽堿受體α1(CHRNα1)ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Nicotinic, Alpha 1 (CHRNa1)規(guī)格:48T/96T

干擾素調(diào)節(jié)因子3(IRF3)ELISA Kit for Interferon Regulatory Factor 3 (IRF3)規(guī)格:48T/96T

煙型膽堿受體β1(CHRNβ1)ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Nicotinic, Beta 1 (CHRNb1)規(guī)格:48T/96T

白介素21(IL21)ELISA Kit for Interleukin 21 (IL21)規(guī)格:48T/96T

軸突生長(zhǎng)誘向因子4(Ntn4)ELISA Kit for Netrin 4 (Ntn4)規(guī)格:48T/96T

絲裂原激活蛋白激酶10(MAPK10)ELISA Kit for Mitogen Activated Protein Kinase 10 (MAPK10)規(guī)格:48T/96T

Ras GTP酶激活蛋白1(RASA1)ELISA Kit for Ras GTPase Activating Protein 1 (RASA1)規(guī)格:48T/96T

解整合素金屬蛋白酶10(ADAM10)ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 10 (ADAM10)規(guī)格:48T/96T

谷受體相互作用蛋白1(GRIP1)ELISA Kit for Glutamate Receptor Interacting Protein 1 (GRIP1)規(guī)格:48T/96T

S100鈣結(jié)合蛋白A6(S100A6)ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A6 (S100A6)規(guī)格:48T/96T

代謝型型谷受體3(GRM3)ELISA Kit for Glutamate Receptor, Metabotropic 3 (GRM3)規(guī)格:48T/96T

白介素4(IL4)ELISA Kit for Interleukin 4 (IL4)規(guī)格:48T/96T
沙門(mén)氏菌第Ⅱ亞屬保存磷酸化抑癌基因p16抗體5,6,7-Trimethoxycoumarin中文名:5,6,7-*氧基別名:分子式:C12H12O5

磷酸化CREB-1抗體Thamsmonin中文名:別名:分子式:C15H16O5

9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框75抗體Hymexelsin中文名:別名:Xeroboside分子式:C21H26O13

線粒體復(fù)合物NDUFS1蛋白抗體6′′-O-β-D-Apiofurasylapterin中文名:別名:分子式:C25H32O14

血栓素合成酶抗體6-(3-Methyl-2-oxobutyroyl)-7-methoxycoumarin中文名:別名:分子式:C15H14O5

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