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哈氏弧菌規(guī)格

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所  在  地上海市

更新時間:2020-12-03 11:26:08瀏覽次數(shù):267次

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哈氏弧菌規(guī)格低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。

儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
規(guī)格參數(shù):
資源名稱  哈氏弧菌規(guī)格
種屬: Vibrio│harveyi

分離基物: 海藻表面

提供形式: 凍干物

安全等級: 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 524

生長條件: 28℃

存儲條件: 真空冷凍干燥法

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培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
產(chǎn)品僅用于科研生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達(dá)3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對穩(wěn)定的細(xì)菌群體,產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時,菌種是指細(xì)菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。
青霉素-鏈霉素-谷氨酰胺溶液(100×)黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus  niger

0.05%胰蛋白酶溶液(含EDTA,溶于PBS)球孢白僵菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

青霉素-鏈霉素-新霉素溶液(PSN),100×釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

0.02% EDTA溶液(Versene液)微桿菌屬拉丁屬名: Microbacterium sp.

硫酸慶大霉素溶液(10mg/mL)產(chǎn)堿假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas alcalophila

青霉素-鏈霉素-兩性霉素B溶液(三抗),100×宋內(nèi)氏志賀氏菌51592規(guī)格: 凍干粉

0.05%胰蛋白酶溶液(溶于PBS)謝瓦曲霉拉丁屬名: Aspergillus chevalieri

0.25%胰蛋白酶溶液(溶于PBS)*蜜環(huán)菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

青霉素-鏈霉素溶液(雙抗),100×紫穗槐根瘤菌用途: 與紫穗槐共生固氮

G418溶液(50mg/mL)白地霉拉丁屬名: Geotrichum  candidum

0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA,溶于D-Hank's)魯氏不動桿菌拉丁屬名: Acinetobacter lwoffii

0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚紅,溶于D-Hank's)繩狀籃狀菌拉丁屬名: Talaromyces funiculosus

0.05%胰蛋白酶溶液(含EDTA,溶于D-Hank's)青霉菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA,溶于PBS)乳酸乳球菌乳脂亞種拉丁屬名: Lactococcus  lactis subsp. cremoris

0.9%鹽水球孢鏈霉菌高加索變種拉丁屬名: Streptomyces globisporus var. caucasicus

7.5%碳酸氫鈉溶液產(chǎn)氨短桿菌拉丁屬名: Brevibacterium ammoniagenes (Cooke and Keith) Breed
4-羥基shēng huà shì jì容量:RT250克

蘇丹紅II SUDcN II 3118-97-6

2,3-Difluoro-4-metxoxypxenylboronic acid 170981-41-6

對甲氧基胺 p-Anisidine,99% 104-94-9 100G 通用試劑

L-山梨糖/清涼茶糖/花楸糖/L-Sorbose BR,98% 10克 國產(chǎn)/進(jìn)口
哈氏弧菌規(guī)格SSPEBUFFERTAETSSSPE 緩沖液,蛋白組學(xué)級白色RTsigma

110-02-1噻吩 99+%Thiopxene

Quercetin櫟精500克BR,99%

3-青基-7-羌基-4-基香豆速 97% 3-CYcNO-7-xy7noXY-4-MqTHYLCOUMcRIN 89-46-1

potewwiumfluoborate硼扶化鉀10克AR,98%

溴甲酚紫鈉shēng huà shì jì容量:50ku

3371-50-4異麥芽三糖ISOMALTOTRIOSE

2-Acetamidopyridine-5-boronic acid 947533-21-3

膽固醇酯 Cholesteryl ate,97% 7144-8-3 25G 通用試劑

錄化,六水合 Nc

 

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