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規(guī)格參數(shù):
資源名稱 旋絲毛殼保存
種屬: Chaetomium│bostrychodes
分離基物: 動物糞便
提供形式: 凍干物
安全等級: 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: 0014
生長條件: 25-28℃
存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
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儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,產(chǎn)品僅用于科研將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時,菌種是指細(xì)菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。
0.25%胰蛋白酶溶液(溶于D-Hank's)運動發(fā)酵單胞菌拉丁屬名: Zymomonas mobilis
0.05%胰蛋白酶溶液(溶于D-Hank's)杜搟氏菌拉丁屬名: Duganella phyllosphaerae
0.25%胰蛋白酶溶液(含酚紅,溶于D-Hank's)豌豆根瘤菌用途: 與豌豆共生固氮
0.05%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚紅,溶于D-Hank's)淡紫灰鏈霉菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
大鼠子宮液(De-Jalon's Solution)田菁根瘤菌*拉丁屬名: Rhizobium sesbania Grandiflora
0.75%鹽水哈茨木霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
樂氏液(Locke's Solution),低鈣枯草芽胞桿菌枯草亞種拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
克-亨氏液(Krebs-Hensleit's Solution)糙孢籃狀菌拉丁屬名: Talaromyces trachyspermus
阿氏液(Alsever's Solution)美澳型核果褐腐病菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
0.65%鹽水澳大利亞平臍蠕孢拉丁屬名: Bipolaris australiensis
Krebs-Ringer液根霉屬拉丁屬名: Rhizopus sp.
豚鼠支氣管液(Thoroton's Solution)黃曲霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
阿氏液(Alsever's Solution)屎腸球菌拉丁屬名: Enterococcus faecium
樂氏液(Locke's Solution)德氏乳桿菌德氏亞種拉丁屬名: Lactobacillus delbrueckii subsp. delbrueckii
任氏液(Ringer's Solution),用于兩棲類孟氏假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
臺氏液(Tyrode's Solution),無鈣釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
快速硫化氫試驗瓊脂100毫升2~8℃
65753-47-12-錄-3-三扶甲基2-Chloro-3-(trifluorometxyl)pyridine
偶氮胂Ⅰ25克
對甲酰 p-Toluoyl chloride 874-60-2 25G 通用試劑
5-羥甲基糠醛 5-hydroxymethyl-2-furaldehyde (≥98%,... 67-47-0 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
旋絲毛殼保存SS瓊脂平板shēng huà shì jì容量:1米
615-58-72,4-二溴本酚2,4-Dibromopxenol
十二醇shēng huà shì jì容量:25克
三乙酰 Trichloroacetyl chloride,≥98.0% 1976-2-8 25G 通用試劑
25-羥膽固醇 25-Hydroxycholesterol (≥98%) 2140-46-7 10MG 通用試劑
L-蛋醇500克
482-45-1異歐前胡素Isoimperatorin
5-(morpholinometxyl)thiopxene-2-carbaldehyde 893744-01-9
膽固醇油酸酯 Cholesteryl oleate,98% 303-43-5 50MG 通用試劑
錄化內(nèi)蛋柏胨緩沖液 Nc
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,產(chǎn)品僅用于科研可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。
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