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硫紅球菌保存

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所  在  地上海市

更新時間:2020-11-22 17:46:11瀏覽次數(shù):152次

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硫紅球菌保存低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。

基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對穩(wěn)定的細(xì)菌群體,產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時,菌種是指細(xì)菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。

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規(guī)格參數(shù):
資源名稱  硫紅球菌保存
種屬: Thiorhodococcus│sp.

分離基物: 水樣/近海深層海水

提供形式: 其它

安全等級: 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 污染物降解和硫代謝

培養(yǎng)基: 1004

生長條件: 25-30℃

存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞,產(chǎn)品僅用于科研從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。
繡球菌安全等級:1提供形式:斜面培養(yǎng)物種屬:Sparassis crispa (Wulfen) Fr.

火針層孔菌(斜面)安全等級:1提供形式:斜面培養(yǎng)物種屬:Phellinus igniarius (L.) Quél.

果生鏈核盤菌(斜面)安全等級:1提供形式:斜面培養(yǎng)物種屬:Monilinia fructigena Honey

蘇云金芽孢桿菌加拿大亞種安全等級:1提供形式:斜面培養(yǎng)物種屬:Bacillus│thuringiensis subsp. canadensis de Barjac and Bonn

彩絨革蓋菌(斜面)模式菌株:安全等級:1種屬:Trametes versicolor (L.) Lloyd

尖孢鐮刀菌番茄?;桶踩燃?1提供形式:斜面培養(yǎng)物種屬:Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici W.C. Snyder & H.N. Han

果生鏈核盤菌安全等級:1提供形式:斜面培養(yǎng)物種屬:Monilinia│fructigena Honey

枯草芽孢桿菌 B安全等級:1提供形式:斜面培養(yǎng)物種屬:Bacillus│subtilis B (Ehrenbery) Cohn

人B-淋巴細(xì)胞激活抗原B7-1elisa檢測試劑盒

英文名稱:Human LAB7-1 ELISA KIT

反應(yīng)性:Human

樣品類型:Serum, plasma, Cell culture supernatant

靈敏度:30 pg/ml

檢測目標(biāo):LAB7-1/CD80

應(yīng)用:Sandwich ELISA
樺剝管菌(樺滴孔菌)現(xiàn)貨,ATCC菌株

假蜜環(huán)菌培養(yǎng),ATCC菌株

秀珍菇保存,ATCC菌株

巴氏蘑菇(姬松茸)售價,ATCC菌株

真姬菇(斑玉蕈,海鮮菇)現(xiàn)貨,ATCC菌株

貝葉多孔菌(灰樹花)培養(yǎng),ATCC菌株

阿魏菇保存,ATCC菌株

荷葉離褶傘售價,ATCC菌株

血管緊張素1(Ang1)ELISA Kit for Angiotensin 1 (Ang1)規(guī)格:48T/96T

B-黑色素瘤抗原5(BAGE5)ELISA Kit for B-Melama Antigen 5 (BAGE5)規(guī)格:48T/96T

驅(qū)動結(jié)合蛋白(KNCN)ELISA Kit for Kicilin (KNCN)規(guī)格:48T/96T

封閉蛋白23(CLDN23)ELISA Kit for Claudin 23 (CLDN23)規(guī)格:48T/96T

Rho蛋白2(RHPN2)ELISA Kit for Rhophilin 2 (RHPN2)規(guī)格:48T/96T

羧酯酶5A(CES5A)ELISA Kit for Carboxylesterase 5A (CES5A)規(guī)格:48T/96T

Vezatin蛋白(VEZT)ELISA Kit for Vezatin (VEZT)規(guī)格:48T/96T

三基鳥苷合酶1(TGS1)ELISA Kit for Trimethylguasine Synthase (TGS1)規(guī)格:48T/96T

蛋白聚糖3(PRG3)ELISA Kit for Proteoglycan 3 (PRG3)規(guī)格:48T/96T

半胱蛋白酶抑制劑9(CST9)ELISA Kit for Cystatin 9 (CST9)規(guī)格:48T/96T

絲組合因子4(SERINC4)ELISA Kit for Serine Incorporator 4 (SERINC4)規(guī)格:48T/96T

減數(shù)分裂重組蛋白5(MEI5)ELISA Kit for Meiotic Recombination Protein 5 (MEI5)規(guī)格:48T/96T
硫紅球菌保存短蛋白聚糖抗體Eupatilin中文名:異澤蘭黃素別名:分子式:C18H16O7

螺旋一環(huán)一螺旋蛋白5抗體6''-O-Acetylastragalin中文名:別名:分子式:C23H22O12

二磷酸3核苷酸酶抗體Podocarpusflavone A中文名:羅漢松雙黃酮A別名:分子式:C31H20O10

腦蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶29抗體Morusil中文名:別名:分子式:C25H26O7

智力發(fā)育調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白BRWD3抗體Juglanin中文名:胡桃苷別名:Kaempferol 3-O-arabifuraside分子式:C20H18O10

 

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